中国肺癌杂志
中國肺癌雜誌
중국폐암잡지
CHINESE JOURNAL OF LUNG CANCER
2011年
4期
305-310
,共6页
石思恩%何泽锋%蔡建春%邱江锋
石思恩%何澤鋒%蔡建春%邱江鋒
석사은%하택봉%채건춘%구강봉
肺肿瘤%顺铂%GRP75%耐药性%RNA干扰%慢病毒
肺腫瘤%順鉑%GRP75%耐藥性%RNA榦擾%慢病毒
폐종류%순박%GRP75%내약성%RNA간우%만병독
背景与目的 GRP75(glucose regulated protein 75)属于热休克蛋白(hot shock protein,HSP)家族,是一种主要位于线粒体的分子伴侣,在某些耐药的肿瘤细胞中高表达.本研究通过慢病毒介导的RNA干扰技术沉默GRP75基因的表达,观察下调GRP75的表达对肿瘤细胞耐药性的影响并探讨GRP75在肿瘤细胞耐药机制中的作用.方法 以顺铂为诱导药物,人肺腺癌细胞系A549为诱导对象,采用逐步增加剂量与大剂量冲击相结合的方法,诱导建立耐顺铂细胞株A549/CDDP.分别将包裹GRP75-shRNA和不含干扰序列的慢病毒转染A549和A549/CDDP细胞,在荧光显微镜下观察各组细胞转染率,应用MTT比色法检测干扰前后各组细胞对顺铂的敏感性,应用Western blot检侧干扰前后各组细胞GRP75,p53,bd-2的表达.结果 各组细胞感染效率均在90%以上,转染后A549/CDDP和A549细胞中GRP75的表达均明显下调(P<0.05).转染前后A549/CDDP细胞对顺铂的耐药指数分别为21.52和4.14.转染后A549/CDDP细胞内p53的表达上调(P<0.05),bcl-2表达下调(P<0.05).结论 GRP75是A549细胞对顺铂耐药机制的相关蛋白之一,其在耐药机制中的作用与其对p53和bcl-2的调控有关.
揹景與目的 GRP75(glucose regulated protein 75)屬于熱休剋蛋白(hot shock protein,HSP)傢族,是一種主要位于線粒體的分子伴侶,在某些耐藥的腫瘤細胞中高錶達.本研究通過慢病毒介導的RNA榦擾技術沉默GRP75基因的錶達,觀察下調GRP75的錶達對腫瘤細胞耐藥性的影響併探討GRP75在腫瘤細胞耐藥機製中的作用.方法 以順鉑為誘導藥物,人肺腺癌細胞繫A549為誘導對象,採用逐步增加劑量與大劑量遲擊相結閤的方法,誘導建立耐順鉑細胞株A549/CDDP.分彆將包裹GRP75-shRNA和不含榦擾序列的慢病毒轉染A549和A549/CDDP細胞,在熒光顯微鏡下觀察各組細胞轉染率,應用MTT比色法檢測榦擾前後各組細胞對順鉑的敏感性,應用Western blot檢側榦擾前後各組細胞GRP75,p53,bd-2的錶達.結果 各組細胞感染效率均在90%以上,轉染後A549/CDDP和A549細胞中GRP75的錶達均明顯下調(P<0.05).轉染前後A549/CDDP細胞對順鉑的耐藥指數分彆為21.52和4.14.轉染後A549/CDDP細胞內p53的錶達上調(P<0.05),bcl-2錶達下調(P<0.05).結論 GRP75是A549細胞對順鉑耐藥機製的相關蛋白之一,其在耐藥機製中的作用與其對p53和bcl-2的調控有關.
배경여목적 GRP75(glucose regulated protein 75)속우열휴극단백(hot shock protein,HSP)가족,시일충주요위우선립체적분자반려,재모사내약적종류세포중고표체.본연구통과만병독개도적RNA간우기술침묵GRP75기인적표체,관찰하조GRP75적표체대종류세포내약성적영향병탐토GRP75재종류세포내약궤제중적작용.방법 이순박위유도약물,인폐선암세포계A549위유도대상,채용축보증가제량여대제량충격상결합적방법,유도건립내순박세포주A549/CDDP.분별장포과GRP75-shRNA화불함간우서렬적만병독전염A549화A549/CDDP세포,재형광현미경하관찰각조세포전염솔,응용MTT비색법검측간우전후각조세포대순박적민감성,응용Western blot검측간우전후각조세포GRP75,p53,bd-2적표체.결과 각조세포감염효솔균재90%이상,전염후A549/CDDP화A549세포중GRP75적표체균명현하조(P<0.05).전염전후A549/CDDP세포대순박적내약지수분별위21.52화4.14.전염후A549/CDDP세포내p53적표체상조(P<0.05),bcl-2표체하조(P<0.05).결론 GRP75시A549세포대순박내약궤제적상관단백지일,기재내약궤제중적작용여기대p53화bcl-2적조공유관.
