动物营养学报
動物營養學報
동물영양학보
ACTA ZOONUTRIMENTA SINICA
2011年
6期
976-982
,共7页
张玉杰%王佳堃%叶均安%刘建新
張玉傑%王佳堃%葉均安%劉建新
장옥걸%왕가곤%협균안%류건신
纤维素结合域%酵母表面展示系统%黏附位点%产琥珀酸丝状杆菌
纖維素結閤域%酵母錶麵展示繫統%黏附位點%產琥珀痠絲狀桿菌
섬유소결합역%효모표면전시계통%점부위점%산호박산사상간균
利用酿酒酵母表面展示系统表达产琥珀酸丝状杆菌S85纤维素结合域家族2(CBD2),分析其纤维黏附位点.将CBD2基因插入质粒pYDI的AGOg2 3'端,构建pMCBD2重组质粒,化学转化pMCBD2至酿酒酵母EBY100中,2%半乳糖诱导CBD2表达于酿酒酵母表面.利用免疫组化技术检测重组酵母细胞在稻草茎细胞壁上的黏附位点.结果表明:利用酿酒酵母表面展示系统可成功表达产琥珀酸丝状杆菌S85的CBD2基因;重组CBD2的pMCBD2-EBY100与稻草茎孵育后,经抗V5异硫氰酸荧光素标记抗体处理可在稻草茎的薄壁、厚壁和维管组织均检测到荧光.产琥珀酸丝状杆菌S85的CBD2黏附稻草多个组织.结果提示:酿酒酵母表面展示技术与免疫组化技术联用研究瘤胃细菌CBD的黏附位点是可行的.
利用釀酒酵母錶麵展示繫統錶達產琥珀痠絲狀桿菌S85纖維素結閤域傢族2(CBD2),分析其纖維黏附位點.將CBD2基因插入質粒pYDI的AGOg2 3'耑,構建pMCBD2重組質粒,化學轉化pMCBD2至釀酒酵母EBY100中,2%半乳糖誘導CBD2錶達于釀酒酵母錶麵.利用免疫組化技術檢測重組酵母細胞在稻草莖細胞壁上的黏附位點.結果錶明:利用釀酒酵母錶麵展示繫統可成功錶達產琥珀痠絲狀桿菌S85的CBD2基因;重組CBD2的pMCBD2-EBY100與稻草莖孵育後,經抗V5異硫氰痠熒光素標記抗體處理可在稻草莖的薄壁、厚壁和維管組織均檢測到熒光.產琥珀痠絲狀桿菌S85的CBD2黏附稻草多箇組織.結果提示:釀酒酵母錶麵展示技術與免疫組化技術聯用研究瘤胃細菌CBD的黏附位點是可行的.
이용양주효모표면전시계통표체산호박산사상간균S85섬유소결합역가족2(CBD2),분석기섬유점부위점.장CBD2기인삽입질립pYDI적AGOg2 3'단,구건pMCBD2중조질립,화학전화pMCBD2지양주효모EBY100중,2%반유당유도CBD2표체우양주효모표면.이용면역조화기술검측중조효모세포재도초경세포벽상적점부위점.결과표명:이용양주효모표면전시계통가성공표체산호박산사상간균S85적CBD2기인;중조CBD2적pMCBD2-EBY100여도초경부육후,경항V5이류청산형광소표기항체처리가재도초경적박벽、후벽화유관조직균검측도형광.산호박산사상간균S85적CBD2점부도초다개조직.결과제시:양주효모표면전시기술여면역조화기술련용연구류위세균CBD적점부위점시가행적.
