色谱
色譜
색보
CHINESE JOURNAL OF CHROMATOGRAPHY
2011年
9期
851-856
,共6页
侯春彦%马俊锋%陶定银%张丽华%梁振%张玉奎
侯春彥%馬俊鋒%陶定銀%張麗華%樑振%張玉奎
후춘언%마준봉%도정은%장려화%량진%장옥규
人神经母细胞瘤%磷酸化肽富集%膜蛋白质%多酶酶解%固定化钛离子亲和色谱%有机-无机杂化硅胶整体材料
人神經母細胞瘤%燐痠化肽富集%膜蛋白質%多酶酶解%固定化鈦離子親和色譜%有機-無機雜化硅膠整體材料
인신경모세포류%린산화태부집%막단백질%다매매해%고정화태리자친화색보%유궤-무궤잡화규효정체재료
针对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞系的磷酸化膜蛋白质组,发展了基于多酶酶解法结合杂化硅胶基质固定化钛离子亲和色谱( Ti4+ -IMAC)整体柱富集的分析策略.该方法通过对细胞裂解液进行超速离心,以及1 mol/LNaC1和0.1 mol/L Na2CO3顺序清洗,获得膜蛋白质组分.所提取的蛋白质分别经胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶和胃蛋白酶平行酶解,产生的肽段经Ti4+ -IMAC整体柱选择性富集磷酸肽后,采用纳升级反相液相色谱分离和质谱鉴定,成功鉴定到43个磷酸化蛋白质,其中有14个定位于膜上.研究结果表明,采用该策略开展SH- SY5Y细胞系磷酸化膜蛋白质组学分析有望加速对该肿瘤的研究和相关潜在标记物的筛选.
針對人神經母細胞瘤SH-SY5Y細胞繫的燐痠化膜蛋白質組,髮展瞭基于多酶酶解法結閤雜化硅膠基質固定化鈦離子親和色譜( Ti4+ -IMAC)整體柱富集的分析策略.該方法通過對細胞裂解液進行超速離心,以及1 mol/LNaC1和0.1 mol/L Na2CO3順序清洗,穫得膜蛋白質組分.所提取的蛋白質分彆經胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶和胃蛋白酶平行酶解,產生的肽段經Ti4+ -IMAC整體柱選擇性富集燐痠肽後,採用納升級反相液相色譜分離和質譜鑒定,成功鑒定到43箇燐痠化蛋白質,其中有14箇定位于膜上.研究結果錶明,採用該策略開展SH- SY5Y細胞繫燐痠化膜蛋白質組學分析有望加速對該腫瘤的研究和相關潛在標記物的篩選.
침대인신경모세포류SH-SY5Y세포계적린산화막단백질조,발전료기우다매매해법결합잡화규효기질고정화태리자친화색보( Ti4+ -IMAC)정체주부집적분석책략.해방법통과대세포렬해액진행초속리심,이급1 mol/LNaC1화0.1 mol/L Na2CO3순서청세,획득막단백질조분.소제취적단백질분별경이단백매、이응유단백매화위단백매평행매해,산생적태단경Ti4+ -IMAC정체주선택성부집린산태후,채용납승급반상액상색보분리화질보감정,성공감정도43개린산화단백질,기중유14개정위우막상.연구결과표명,채용해책략개전SH- SY5Y세포계린산화막단백질조학분석유망가속대해종류적연구화상관잠재표기물적사선.
