中华医学杂志
中華醫學雜誌
중화의학잡지
National Medical Journal of China
2007年
12期
838-841
,共4页
阴津华%黎明%杨静%吴从愿
陰津華%黎明%楊靜%吳從願
음진화%려명%양정%오종원
前脂肪细胞%原代培养%瘦素%脂联素
前脂肪細胞%原代培養%瘦素%脂聯素
전지방세포%원대배양%수소%지련소
目的 建立人网膜前脂肪细胞原代培养的方法,研究内脏脂肪增生肥大和内分泌功能的生物学特性.方法 选取人网膜脂肪组织,采用酶消化细胞原代培养出梭形细胞,对培养细胞进行形态学观察、MTT法测定生长曲线、油红O脂肪染色法进行脂肪细胞鉴定、酶联免疫法测定脂肪细胞因子瘦素和脂联素水平.结果 培养出的梭形细胞成分均一.第3天开始增殖,4～9 d为指数增长期,倍增时间约为60 h.经分化诱导21 d约有90%的细胞分化为成熟脂肪细胞.前脂肪细胞可检出低水平瘦素分泌,经诱导分化分泌量持续增多,第17天达峰值(1.6 ng·ml-1·24 h-1),之后保持高分泌状态至诱导结束;而脂联素直到诱导分化第7天始可检测到低水平分泌,此时光镜下已可见胞质含脂滴的细胞;7～17 d分泌逐渐增多,第17天分泌达峰值(99 ng·ml-1·24 h-1),之后有明显下降趋势.经油红O脂肪染色和瘦素、脂联素分泌检测证实分离培养的细胞为功能活跃的前脂肪细胞.结论 成功建立了人网膜前脂肪细胞模型,观察到瘦素和脂联素不同分泌模式.脂联素可作为鉴定前脂肪细胞分化成熟的内分泌功能特异标志物.
目的 建立人網膜前脂肪細胞原代培養的方法,研究內髒脂肪增生肥大和內分泌功能的生物學特性.方法 選取人網膜脂肪組織,採用酶消化細胞原代培養齣梭形細胞,對培養細胞進行形態學觀察、MTT法測定生長麯線、油紅O脂肪染色法進行脂肪細胞鑒定、酶聯免疫法測定脂肪細胞因子瘦素和脂聯素水平.結果 培養齣的梭形細胞成分均一.第3天開始增殖,4～9 d為指數增長期,倍增時間約為60 h.經分化誘導21 d約有90%的細胞分化為成熟脂肪細胞.前脂肪細胞可檢齣低水平瘦素分泌,經誘導分化分泌量持續增多,第17天達峰值(1.6 ng·ml-1·24 h-1),之後保持高分泌狀態至誘導結束;而脂聯素直到誘導分化第7天始可檢測到低水平分泌,此時光鏡下已可見胞質含脂滴的細胞;7～17 d分泌逐漸增多,第17天分泌達峰值(99 ng·ml-1·24 h-1),之後有明顯下降趨勢.經油紅O脂肪染色和瘦素、脂聯素分泌檢測證實分離培養的細胞為功能活躍的前脂肪細胞.結論 成功建立瞭人網膜前脂肪細胞模型,觀察到瘦素和脂聯素不同分泌模式.脂聯素可作為鑒定前脂肪細胞分化成熟的內分泌功能特異標誌物.
목적 건립인망막전지방세포원대배양적방법,연구내장지방증생비대화내분비공능적생물학특성.방법 선취인망막지방조직,채용매소화세포원대배양출사형세포,대배양세포진행형태학관찰、MTT법측정생장곡선、유홍O지방염색법진행지방세포감정、매련면역법측정지방세포인자수소화지련소수평.결과 배양출적사형세포성분균일.제3천개시증식,4～9 d위지수증장기,배증시간약위60 h.경분화유도21 d약유90%적세포분화위성숙지방세포.전지방세포가검출저수평수소분비,경유도분화분비량지속증다,제17천체봉치(1.6 ng·ml-1·24 h-1),지후보지고분비상태지유도결속;이지련소직도유도분화제7천시가검측도저수평분비,차시광경하이가견포질함지적적세포;7～17 d분비축점증다,제17천분비체봉치(99 ng·ml-1·24 h-1),지후유명현하강추세.경유홍O지방염색화수소、지련소분비검측증실분리배양적세포위공능활약적전지방세포.결론 성공건립료인망막전지방세포모형,관찰도수소화지련소불동분비모식.지련소가작위감정전지방세포분화성숙적내분비공능특이표지물.
