CAJ | 학술논문

目的:探讨原核增强子能否提高hTERT启动子的转录活性及对其肿瘤特异性的影响.方法:将增强子SV40、CMV分别或组合构建一系列GFP和荧光素酶报告基因载体,转染人肝癌、鼻咽癌、宫颈癌、结直肠癌细胞、成纤维肉瘤和正常成纤维细胞,流式细胞仪计数和双荧光酶分析系统检测基因的表达效率.结果:在正常成纤维细胞中这些载体均不能有效表达;而在肿瘤细胞中hTERT启动子能介导基因表达但效率不高,增强子能使基因表达增强3～26倍,特别是单独CMV增强子和SV40-CMV双增强子使荧光素酶表达提高20～26倍,是常用的CMV增强子/启动子的2～7倍;完整CMV增强子/启动子对hTERT启动子的活性影响因不同细胞而异.结论:增强子能显著增强hTERT启动子的转录活性并对其肿瘤特异性没有影响,CMV增强子或SV40-CMV双增强子/hTERT启动子是高效特异的通用调控元件,用于靶向性肿瘤基因治疗具有巨大潜力.
목적:탐토원핵증강자능부제고hTERT계동자적전록활성급대기종류특이성적영향.방법:장증강자SV40、CMV분별혹조합구건일계렬GFP화형광소매보고기인재체,전염인간암、비인암、궁경암、결직장암세포、성섬유육류화정상성섬유세포,류식세포의계수화쌍형광매분석계통검측기인적표체효솔.결과:재정상성섬유세포중저사재체균불능유효표체;이재종류세포중hTERT계동자능개도기인표체단효솔불고,증강자능사기인표체증강3～26배,특별시단독CMV증강자화SV40-CMV쌍증강자사형광소매표체제고20～26배,시상용적CMV증강자/계동자적2～7배;완정CMV증강자/계동자대hTERT계동자적활성영향인불동세포이이.결론:증강자능현저증강hTERT계동자적전록활성병대기종류특이성몰유영향,CMV증강자혹SV40-CMV쌍증강자/hTERT계동자시고효특이적통용조공원건,용우파향성종류기인치료구유거대잠력.