华中科技大学学报（医学版）
華中科技大學學報（醫學版）
화중과기대학학보（의학판）
ACTA UNIVERSITATIS MEDICINAE TONGJI
2008年
3期
368-371
,共4页
吴志洪%陈宏翔%陈嵘袆%帅俊%许莉%俞莺%严小枫%李家文%涂亚庭
吳誌洪%陳宏翔%陳嶸袆%帥俊%許莉%俞鶯%嚴小楓%李傢文%塗亞庭
오지홍%진굉상%진영위%수준%허리%유앵%엄소풍%리가문%도아정
淋球菌%外源指导序列%多传递耐药
淋毬菌%外源指導序列%多傳遞耐藥
림구균%외원지도서렬%다전체내약
目的 研究外源指导序列(external guide sequence,EGS) 在体外逆转淋球菌多重耐药株为敏感株中的作用.方法 构建针对多传递耐药(multiple transferable resistance,mtr)系统中MtrC基因,并含卡那霉素抗性基因的EGS重组质粒pET-28a(+)-EGS-MtrC,采用常规CaCl2法将重组质粒导入临床分离的多重耐药淋球菌中,通过菌落PCR进行鉴定,并利用分光光度计检测阳性转化菌在含不同浓度氨苄西林的培养基中的生长情况,测定淋球菌转化前后对阿奇霉素、结晶紫、红霉素、TritonX-100、四环素的最小抑菌浓度(MIC).结果 PCR结果显示阳性转化菌含有预期大小的转化片段;多重耐药淋球菌在浓度为50、100 μg/ml的氨苄西林培养基中生长良好,而导入EGS-MtrC的转化菌在含100 μg/ml氨苄西林的培养基中不能生长,在50 μg/ml氨苄西林培养基中生长受抑制.导入EGS-MtrC的转化菌对阿奇霉素、结晶紫、红霉素、TritonX-100、四环素的MIC值均有明显下降.结论 pET-28a(+)-EGS-MtrC转化淋球菌成功;导入EGS-MtrC的转化菌部分恢复了对氨苄西林的敏感性;转化菌对阿奇霉素、结晶紫、红霉素、TritonX-100、四环素的敏感性增加.
目的 研究外源指導序列(external guide sequence,EGS) 在體外逆轉淋毬菌多重耐藥株為敏感株中的作用.方法 構建針對多傳遞耐藥(multiple transferable resistance,mtr)繫統中MtrC基因,併含卡那黴素抗性基因的EGS重組質粒pET-28a(+)-EGS-MtrC,採用常規CaCl2法將重組質粒導入臨床分離的多重耐藥淋毬菌中,通過菌落PCR進行鑒定,併利用分光光度計檢測暘性轉化菌在含不同濃度氨芐西林的培養基中的生長情況,測定淋毬菌轉化前後對阿奇黴素、結晶紫、紅黴素、TritonX-100、四環素的最小抑菌濃度(MIC).結果 PCR結果顯示暘性轉化菌含有預期大小的轉化片段;多重耐藥淋毬菌在濃度為50、100 μg/ml的氨芐西林培養基中生長良好,而導入EGS-MtrC的轉化菌在含100 μg/ml氨芐西林的培養基中不能生長,在50 μg/ml氨芐西林培養基中生長受抑製.導入EGS-MtrC的轉化菌對阿奇黴素、結晶紫、紅黴素、TritonX-100、四環素的MIC值均有明顯下降.結論 pET-28a(+)-EGS-MtrC轉化淋毬菌成功;導入EGS-MtrC的轉化菌部分恢複瞭對氨芐西林的敏感性;轉化菌對阿奇黴素、結晶紫、紅黴素、TritonX-100、四環素的敏感性增加.
목적 연구외원지도서렬(external guide sequence,EGS) 재체외역전림구균다중내약주위민감주중적작용.방법 구건침대다전체내약(multiple transferable resistance,mtr)계통중MtrC기인,병함잡나매소항성기인적EGS중조질립pET-28a(+)-EGS-MtrC,채용상규CaCl2법장중조질립도입림상분리적다중내약림구균중,통과균락PCR진행감정,병이용분광광도계검측양성전화균재함불동농도안변서림적배양기중적생장정황,측정림구균전화전후대아기매소、결정자、홍매소、TritonX-100、사배소적최소억균농도(MIC).결과 PCR결과현시양성전화균함유예기대소적전화편단;다중내약림구균재농도위50、100 μg/ml적안변서림배양기중생장량호,이도입EGS-MtrC적전화균재함100 μg/ml안변서림적배양기중불능생장,재50 μg/ml안변서림배양기중생장수억제.도입EGS-MtrC적전화균대아기매소、결정자、홍매소、TritonX-100、사배소적MIC치균유명현하강.결론 pET-28a(+)-EGS-MtrC전화림구균성공;도입EGS-MtrC적전화균부분회복료대안변서림적민감성;전화균대아기매소、결정자、홍매소、TritonX-100、사배소적민감성증가.
