微生物学杂志
微生物學雜誌
미생물학잡지
JOURNAL OF MICROBIOLOGY
2010年
5期
68-73
,共6页
蔡琪敏%蒋冬花%嵇豪%蓝丽精
蔡琪敏%蔣鼕花%嵇豪%藍麗精
채기민%장동화%혜호%람려정
红曲霉%根癌农杆菌%T-DNA%突变体库
紅麯黴%根癌農桿菌%T-DNA%突變體庫
홍곡매%근암농간균%T-DNA%돌변체고
通过优化各种转化因素,建立了根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导红曲霉(Monascus)的高效转化体系:红曲霉在PDA培养基培养21 d后收集孢子,制备红曲霉孢子悬浮液,浓度为106 个/mL,根癌农杆菌浓度为OD600值0.5,诱导剂AS浓度为100 μmol/L,农杆菌与红曲霉在25 ℃共培养3 d.采用此转化体系构建了含有530多个转化子的红曲霉T-DNA插入突变体库.随机选取50株转化子菌株进行分子验证和稳定性检测,证明T-DNA成功插入红曲霉基因组DNA中,并能稳定遗传.最后,通过形态观察筛选出8株变异较大的菌株,为以后的红曲霉基因功能研究奠定了一定的基础.
通過優化各種轉化因素,建立瞭根癌農桿菌(Agrobacterium tumefaciens)介導紅麯黴(Monascus)的高效轉化體繫:紅麯黴在PDA培養基培養21 d後收集孢子,製備紅麯黴孢子懸浮液,濃度為106 箇/mL,根癌農桿菌濃度為OD600值0.5,誘導劑AS濃度為100 μmol/L,農桿菌與紅麯黴在25 ℃共培養3 d.採用此轉化體繫構建瞭含有530多箇轉化子的紅麯黴T-DNA插入突變體庫.隨機選取50株轉化子菌株進行分子驗證和穩定性檢測,證明T-DNA成功插入紅麯黴基因組DNA中,併能穩定遺傳.最後,通過形態觀察篩選齣8株變異較大的菌株,為以後的紅麯黴基因功能研究奠定瞭一定的基礎.
통과우화각충전화인소,건립료근암농간균(Agrobacterium tumefaciens)개도홍곡매(Monascus)적고효전화체계:홍곡매재PDA배양기배양21 d후수집포자,제비홍곡매포자현부액,농도위106 개/mL,근암농간균농도위OD600치0.5,유도제AS농도위100 μmol/L,농간균여홍곡매재25 ℃공배양3 d.채용차전화체계구건료함유530다개전화자적홍곡매T-DNA삽입돌변체고.수궤선취50주전화자균주진행분자험증화은정성검측,증명T-DNA성공삽입홍곡매기인조DNA중,병능은정유전.최후,통과형태관찰사선출8주변이교대적균주,위이후적홍곡매기인공능연구전정료일정적기출.
