湖南师范大学自然科学学报
湖南師範大學自然科學學報
호남사범대학자연과학학보
ACTA SCIENTIARUM NATURALIUM UNIVERSITATIS NORMALIS HUNANENSIS
2011年
2期
65-70
,共6页
易朵%王成%帅勇%肖湘文%赵晓蒙%周畅
易朵%王成%帥勇%肖湘文%趙曉矇%週暢
역타%왕성%수용%초상문%조효몽%주창
HMGB4%原核表达%纯化%多克隆抗体
HMGB4%原覈錶達%純化%多剋隆抗體
HMGB4%원핵표체%순화%다극륭항체
高迁移率族蛋白B4(high mobility group box,HMGB4)是HMGB家族的新成员,研究表明其可能在睾丸发育和精子发生等方面发挥重要作用.为进一步研究HMGB4的结构、功能及与其相互作用的蛋白而进行his-HMGB4融合蛋白表达载体的构建.序列鉴定分析后,用该重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),异丙基β-D硫代半乳糖苷(IPTG)诱导产生his-HMGB4融合蛋白,继而纯化获得相对分子质量约25000的融合蛋白.将此融合蛋白免疫新西兰兔,经Westem印迹和ELISA检测,制备的抗体可特异性识别HMGB4蛋白,其效价达1:20000.获得的高效价、高特异性的兔抗HMGB4蛋白多克隆抗体为下阶段研究HMGB4的功能奠定了基础.
高遷移率族蛋白B4(high mobility group box,HMGB4)是HMGB傢族的新成員,研究錶明其可能在睪汍髮育和精子髮生等方麵髮揮重要作用.為進一步研究HMGB4的結構、功能及與其相互作用的蛋白而進行his-HMGB4融閤蛋白錶達載體的構建.序列鑒定分析後,用該重組質粒轉化大腸桿菌BL21(DE3),異丙基β-D硫代半乳糖苷(IPTG)誘導產生his-HMGB4融閤蛋白,繼而純化穫得相對分子質量約25000的融閤蛋白.將此融閤蛋白免疫新西蘭兔,經Westem印跡和ELISA檢測,製備的抗體可特異性識彆HMGB4蛋白,其效價達1:20000.穫得的高效價、高特異性的兔抗HMGB4蛋白多剋隆抗體為下階段研究HMGB4的功能奠定瞭基礎.
고천이솔족단백B4(high mobility group box,HMGB4)시HMGB가족적신성원,연구표명기가능재고환발육화정자발생등방면발휘중요작용.위진일보연구HMGB4적결구、공능급여기상호작용적단백이진행his-HMGB4융합단백표체재체적구건.서렬감정분석후,용해중조질립전화대장간균BL21(DE3),이병기β-D류대반유당감(IPTG)유도산생his-HMGB4융합단백,계이순화획득상대분자질량약25000적융합단백.장차융합단백면역신서란토,경Westem인적화ELISA검측,제비적항체가특이성식별HMGB4단백,기효개체1:20000.획득적고효개、고특이성적토항HMGB4단백다극륭항체위하계단연구HMGB4적공능전정료기출.
