生物技术通报
生物技術通報
생물기술통보
BIOTECHNOLOGY BULLETIN
2011年
11期
130-133
,共4页
赵淑玲%梁昌镛%李敏%王海花%张高瞻
趙淑玲%樑昌鏞%李敏%王海花%張高瞻
조숙령%량창용%리민%왕해화%장고첨
RNA干扰%美洲棉铃虫细胞%体外转录%绿色荧光蛋白%昆虫
RNA榦擾%美洲棉鈴蟲細胞%體外轉錄%綠色熒光蛋白%昆蟲
RNA간우%미주면령충세포%체외전록%록색형광단백%곤충
为了分析在美洲棉铃虫细胞( HzAM1)内RNAi的效果,将egfp基因克隆到含有双向T7启动子/终止子的质粒载体中,在体外合成全长的增强型绿色荧光蛋白(egfp)基因dsRNA,将dsRNA和含有能在昆虫细胞内表达eGFP的质粒一起转染HzAM1细胞,分析dsRNA对eGFP表达的抑制作用.结果显示,由egfp基因转录的长dsRNA能有效抑制HzAM1细胞内eGFP的表达,而且该抑制作用表现为剂量依赖效应.但是抑制作用并不彻底,在高剂量的dsRNA处理下,仍有部分细胞内能观察到eGFP的表达.
為瞭分析在美洲棉鈴蟲細胞( HzAM1)內RNAi的效果,將egfp基因剋隆到含有雙嚮T7啟動子/終止子的質粒載體中,在體外閤成全長的增彊型綠色熒光蛋白(egfp)基因dsRNA,將dsRNA和含有能在昆蟲細胞內錶達eGFP的質粒一起轉染HzAM1細胞,分析dsRNA對eGFP錶達的抑製作用.結果顯示,由egfp基因轉錄的長dsRNA能有效抑製HzAM1細胞內eGFP的錶達,而且該抑製作用錶現為劑量依賴效應.但是抑製作用併不徹底,在高劑量的dsRNA處理下,仍有部分細胞內能觀察到eGFP的錶達.
위료분석재미주면령충세포( HzAM1)내RNAi적효과,장egfp기인극륭도함유쌍향T7계동자/종지자적질립재체중,재체외합성전장적증강형록색형광단백(egfp)기인dsRNA,장dsRNA화함유능재곤충세포내표체eGFP적질립일기전염HzAM1세포,분석dsRNA대eGFP표체적억제작용.결과현시,유egfp기인전록적장dsRNA능유효억제HzAM1세포내eGFP적표체,이차해억제작용표현위제량의뢰효응.단시억제작용병불철저,재고제량적dsRNA처리하,잉유부분세포내능관찰도eGFP적표체.
