生命科学研究
生命科學研究
생명과학연구
LIFE SCIENCE RESEARCH
2003年
2期
144-146
,共3页
林明辉%荫俊%王慧%邢洪光%宋伟%侯晓军
林明輝%蔭俊%王慧%邢洪光%宋偉%侯曉軍
림명휘%음준%왕혜%형홍광%송위%후효군
A型产气荚膜梭菌%α毒素%克隆%基因结构分析
A型產氣莢膜梭菌%α毒素%剋隆%基因結構分析
A형산기협막사균%α독소%극륭%기인결구분석
应用PCR技术,从产气荚膜梭菌菌株NCTC64609中,扩增出A型产气荚膜梭菌α毒素基因C端片段(cpa408),并将其克隆至pMD18-T载体中.经转化,α互补蓝白菌落选择培养,提取质粒,进行PCR和EcoR I、Pst I双酶切鉴定,筛选出阳性重组克隆.经核苷酸序列分析证实,cpa408基因阅读开放框架由372个核苷酸组成,编码124个氨基酸.经计算机分析,cpa408基因序列与国外文献报道的A型产气荚膜梭菌α毒素基因C端片段同源性达99%以上,表明所克隆的基因即为α毒素基因C端片段.
應用PCR技術,從產氣莢膜梭菌菌株NCTC64609中,擴增齣A型產氣莢膜梭菌α毒素基因C耑片段(cpa408),併將其剋隆至pMD18-T載體中.經轉化,α互補藍白菌落選擇培養,提取質粒,進行PCR和EcoR I、Pst I雙酶切鑒定,篩選齣暘性重組剋隆.經覈苷痠序列分析證實,cpa408基因閱讀開放框架由372箇覈苷痠組成,編碼124箇氨基痠.經計算機分析,cpa408基因序列與國外文獻報道的A型產氣莢膜梭菌α毒素基因C耑片段同源性達99%以上,錶明所剋隆的基因即為α毒素基因C耑片段.
응용PCR기술,종산기협막사균균주NCTC64609중,확증출A형산기협막사균α독소기인C단편단(cpa408),병장기극륭지pMD18-T재체중.경전화,α호보람백균락선택배양,제취질립,진행PCR화EcoR I、Pst I쌍매절감정,사선출양성중조극륭.경핵감산서렬분석증실,cpa408기인열독개방광가유372개핵감산조성,편마124개안기산.경계산궤분석,cpa408기인서렬여국외문헌보도적A형산기협막사균α독소기인C단편단동원성체99%이상,표명소극륭적기인즉위α독소기인C단편단.
