基础医学与临床
基礎醫學與臨床
기출의학여림상
BASIC MEDICAL SCIENCES AND CLINICS
2003年
3期
287-291
,共5页
母生梅%马兵%于和鸣%李学军
母生梅%馬兵%于和鳴%李學軍
모생매%마병%우화명%리학군
水孔蛋白%乙酰唑胺%激光共聚焦扫描显微镜
水孔蛋白%乙酰唑胺%激光共聚焦掃描顯微鏡
수공단백%을선서알%격광공취초소묘현미경
为明确乙酰唑胺对水孔蛋白-1(aquaporin-1,AQP1)基因表达的抑制是否与其对细胞内pH和Ca2+浓度的影响有关,采用激光共聚焦扫描显微镜的技术观察不同培养条件下(培养液中含或不含NaHCO3),10-5 mol*L-1乙酰唑胺对原代培养的大鼠肾脏近曲小管上皮细胞内pH和Ca2+浓度的影响,同时用免疫荧光法观察给药1d、3d、7d后AQP1表达的变化.结果显示在含NaHCO3组,乙酰唑胺处理7d后,使细胞内的H+探针的荧光强度由91.81±5.44降至39.58±3.10, Ca2+探针荧光强度由18.23±1.02降至11.5±1.03,AQP1蛋白荧光强度由44.4±1.86减少到25.91±1.97;在不含NaHCO3组,细胞内pH和Ca2+浓度均无明显变化;但AQP1蛋白的荧光强度由43.15±2.97明显减少到23.85±1.92.结果表明乙酰唑胺对细胞内pH和Ca2+浓度的调节依赖于细胞外液HCO3-的存在,而它对AQP1表达的抑制与细胞内pH和Ca2+浓度的改变无关.
為明確乙酰唑胺對水孔蛋白-1(aquaporin-1,AQP1)基因錶達的抑製是否與其對細胞內pH和Ca2+濃度的影響有關,採用激光共聚焦掃描顯微鏡的技術觀察不同培養條件下(培養液中含或不含NaHCO3),10-5 mol*L-1乙酰唑胺對原代培養的大鼠腎髒近麯小管上皮細胞內pH和Ca2+濃度的影響,同時用免疫熒光法觀察給藥1d、3d、7d後AQP1錶達的變化.結果顯示在含NaHCO3組,乙酰唑胺處理7d後,使細胞內的H+探針的熒光彊度由91.81±5.44降至39.58±3.10, Ca2+探針熒光彊度由18.23±1.02降至11.5±1.03,AQP1蛋白熒光彊度由44.4±1.86減少到25.91±1.97;在不含NaHCO3組,細胞內pH和Ca2+濃度均無明顯變化;但AQP1蛋白的熒光彊度由43.15±2.97明顯減少到23.85±1.92.結果錶明乙酰唑胺對細胞內pH和Ca2+濃度的調節依賴于細胞外液HCO3-的存在,而它對AQP1錶達的抑製與細胞內pH和Ca2+濃度的改變無關.
위명학을선서알대수공단백-1(aquaporin-1,AQP1)기인표체적억제시부여기대세포내pH화Ca2+농도적영향유관,채용격광공취초소묘현미경적기술관찰불동배양조건하(배양액중함혹불함NaHCO3),10-5 mol*L-1을선서알대원대배양적대서신장근곡소관상피세포내pH화Ca2+농도적영향,동시용면역형광법관찰급약1d、3d、7d후AQP1표체적변화.결과현시재함NaHCO3조,을선서알처리7d후,사세포내적H+탐침적형광강도유91.81±5.44강지39.58±3.10, Ca2+탐침형광강도유18.23±1.02강지11.5±1.03,AQP1단백형광강도유44.4±1.86감소도25.91±1.97;재불함NaHCO3조,세포내pH화Ca2+농도균무명현변화;단AQP1단백적형광강도유43.15±2.97명현감소도23.85±1.92.결과표명을선서알대세포내pH화Ca2+농도적조절의뢰우세포외액HCO3-적존재,이타대AQP1표체적억제여세포내pH화Ca2+농도적개변무관.