军医进修学院学报
軍醫進脩學院學報
군의진수학원학보
ACADEMIC JOURNAL OF PLA POSTGRADUATE MEDICAL SCHOOL
2006年
4期
268-270
,共3页
符伟军%史立新%洪宝发%王晓雄%朱晓应%潘进勇%高江平
符偉軍%史立新%洪寶髮%王曉雄%硃曉應%潘進勇%高江平
부위군%사립신%홍보발%왕효웅%주효응%반진용%고강평
膀胱肿瘤%基因%p53%启动子%基因疗法
膀胱腫瘤%基因%p53%啟動子%基因療法
방광종류%기인%p53%계동자%기인요법
目的:构建人端粒酶逆转录酶基因(hTERT)启动子调控的含有治疗基因的质粒,探讨在膀胱癌细胞株中特异性靶向转录表达及其潜在的临床意义.方法:将hTERT起始转录区上游的启动子序列克隆到含有绿色荧光蛋白(GFP)基因及含野生型p53基因的质粒上,分别构建成质粒phTERT-GFP及 phTERT-p53.脂质体转染法瞬时转染膀胱癌细胞株T24,应用荧光显微镜、噻唑蓝(MTT)法等方法观察在转染细胞中的差异性表达及膀胱癌细胞生长的靶向性抑制作用.结果:在端粒酶阳性的膀胱细胞中观察到hTERT启动子调控的绿色荧光蛋白的靶向性稳定表达,转染hTERT启动子调控的野生型p53基因靶向性抑制膀胱癌细胞生长,但对端粒酶阴性的正常细胞无明显影响(P＜0.05). 结论:成功构建的hTERT启动子调控表达的野生型p53基因和GFP基因可在膀胱癌细胞T24中靶向性表达,hTERT启动子调控表达p53基因可靶向性抑制膀胱癌细胞生长.
目的:構建人耑粒酶逆轉錄酶基因(hTERT)啟動子調控的含有治療基因的質粒,探討在膀胱癌細胞株中特異性靶嚮轉錄錶達及其潛在的臨床意義.方法:將hTERT起始轉錄區上遊的啟動子序列剋隆到含有綠色熒光蛋白(GFP)基因及含野生型p53基因的質粒上,分彆構建成質粒phTERT-GFP及 phTERT-p53.脂質體轉染法瞬時轉染膀胱癌細胞株T24,應用熒光顯微鏡、噻唑藍(MTT)法等方法觀察在轉染細胞中的差異性錶達及膀胱癌細胞生長的靶嚮性抑製作用.結果:在耑粒酶暘性的膀胱細胞中觀察到hTERT啟動子調控的綠色熒光蛋白的靶嚮性穩定錶達,轉染hTERT啟動子調控的野生型p53基因靶嚮性抑製膀胱癌細胞生長,但對耑粒酶陰性的正常細胞無明顯影響(P＜0.05). 結論:成功構建的hTERT啟動子調控錶達的野生型p53基因和GFP基因可在膀胱癌細胞T24中靶嚮性錶達,hTERT啟動子調控錶達p53基因可靶嚮性抑製膀胱癌細胞生長.
목적:구건인단립매역전록매기인(hTERT)계동자조공적함유치료기인적질립,탐토재방광암세포주중특이성파향전록표체급기잠재적림상의의.방법:장hTERT기시전록구상유적계동자서렬극륭도함유록색형광단백(GFP)기인급함야생형p53기인적질립상,분별구건성질립phTERT-GFP급 phTERT-p53.지질체전염법순시전염방광암세포주T24,응용형광현미경、새서람(MTT)법등방법관찰재전염세포중적차이성표체급방광암세포생장적파향성억제작용.결과:재단립매양성적방광세포중관찰도hTERT계동자조공적록색형광단백적파향성은정표체,전염hTERT계동자조공적야생형p53기인파향성억제방광암세포생장,단대단립매음성적정상세포무명현영향(P＜0.05). 결론:성공구건적hTERT계동자조공표체적야생형p53기인화GFP기인가재방광암세포T24중파향성표체,hTERT계동자조공표체p53기인가파향성억제방광암세포생장.
