南华大学学报（医学版）
南華大學學報（醫學版）
남화대학학보（의학판）
JOURNAL OF NANHUA UNIVERSITY(MEDICAL EDITION)
2007年
1期
1-3
,共3页
周艺%王鑫%朱翠明%蒋永林%粟盛梅%尹卫国%万艳平
週藝%王鑫%硃翠明%蔣永林%粟盛梅%尹衛國%萬豔平
주예%왕흠%주취명%장영림%속성매%윤위국%만염평
人乳头瘤病毒%E6基因%E6蛋白
人乳頭瘤病毒%E6基因%E6蛋白
인유두류병독%E6기인%E6단백
目的 构建HPV16 E6基因的真核表达载体,为在酵母菌中表达以及进一步探讨HPV16 E6基因与宫颈癌发生的关系奠定前期实验基础.方法 用PCR扩增含EcoRⅠ和BamHⅠ酶切位点的E6基因序列,双酶切pGADT7载体与E6基因PCR产物,纯化回收后,用连接酶将二者连接并转化大肠杆菌JM109,筛选阳性克隆,并对其进行双酶切和测序鉴定,构建HPV16 E6基因的真核表达载体pGADT7-E6.结果 双酶切pGADT7-E6后,琼脂糖凝胶电泳显示2个片段,分别在约500 bp与8.0 kb处.DNA测序结果经与GenBank登录的序列做BLAST分析,显示重组质粒含有477 bp的目的 基因片段,读码框正确,无碱基错配和移码突变.结论 成功构建了HPV16 E6基因真核表达载体pGADT7-E6.
目的 構建HPV16 E6基因的真覈錶達載體,為在酵母菌中錶達以及進一步探討HPV16 E6基因與宮頸癌髮生的關繫奠定前期實驗基礎.方法 用PCR擴增含EcoRⅠ和BamHⅠ酶切位點的E6基因序列,雙酶切pGADT7載體與E6基因PCR產物,純化迴收後,用連接酶將二者連接併轉化大腸桿菌JM109,篩選暘性剋隆,併對其進行雙酶切和測序鑒定,構建HPV16 E6基因的真覈錶達載體pGADT7-E6.結果 雙酶切pGADT7-E6後,瓊脂糖凝膠電泳顯示2箇片段,分彆在約500 bp與8.0 kb處.DNA測序結果經與GenBank登錄的序列做BLAST分析,顯示重組質粒含有477 bp的目的 基因片段,讀碼框正確,無堿基錯配和移碼突變.結論 成功構建瞭HPV16 E6基因真覈錶達載體pGADT7-E6.
목적 구건HPV16 E6기인적진핵표체재체,위재효모균중표체이급진일보탐토HPV16 E6기인여궁경암발생적관계전정전기실험기출.방법 용PCR확증함EcoRⅠ화BamHⅠ매절위점적E6기인서렬,쌍매절pGADT7재체여E6기인PCR산물,순화회수후,용련접매장이자련접병전화대장간균JM109,사선양성극륭,병대기진행쌍매절화측서감정,구건HPV16 E6기인적진핵표체재체pGADT7-E6.결과 쌍매절pGADT7-E6후,경지당응효전영현시2개편단,분별재약500 bp여8.0 kb처.DNA측서결과경여GenBank등록적서렬주BLAST분석,현시중조질립함유477 bp적목적 기인편단,독마광정학,무감기착배화이마돌변.결론 성공구건료HPV16 E6기인진핵표체재체pGADT7-E6.
