临床血液学杂志(输血与检验版)
臨床血液學雜誌(輸血與檢驗版)
림상혈액학잡지(수혈여검험판)
JOURNAL OF CLINICAL HEMATOLOGY(BLOOD TRANSFUSION AND LABORATORY MEDICINE EDITION)
2008年
5期
526-529
,共4页
李一荣%胡丽华%陈凤花%潘世秀%周志明
李一榮%鬍麗華%陳鳳花%潘世秀%週誌明
리일영%호려화%진봉화%반세수%주지명
人白细胞抗原B27%基因分型%实时%荧光%聚合酶链反应
人白細胞抗原B27%基因分型%實時%熒光%聚閤酶鏈反應
인백세포항원B27%기인분형%실시%형광%취합매련반응
目的:建立一种快速、灵敏的实时荧光聚合酶链反应(PCR)对中国汉族人群的人白细胞抗原B27(HLA-B27)进行基因分型.方法:采用SYBR GreenⅠ荧光PCR法对120例已定型的标本、230例健康志愿者、54例类风湿因子(RF)阳性患者和36例抗核抗体(ANA)阳性患者的HLA-B27 DNA进行实时检测,并采用熔解曲线对HLA-B27进行基因分型.结果:①熔解曲线分析显示,β珠蛋白PCR产物的Tm平均值为87.82℃,HLA-B27 PCR产物的Tm平均值为90.54℃,HLA-B27阴性标本仅在87.82℃处存在β珠蛋白的熔解曲线峰,而阳性标本则于87.82℃和90.54℃处出现两个熔解曲线峰,且ΔTm约为2.72℃;②对120个已定型的标本,SYBR GreenⅠ实时荧光PCR法与传统的PCR-SSP(序列特异性引物)结果完全吻合;③健康志愿者、RF阳性患者和ANA阳性患者HLA-B27 DNA阳性率分别为2.6%(6/230)、5.7%(2/54)和5.6%(2/36).结论:SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR法是一种快速、灵敏的HLA-B27基因分型方法,具有传统的PCR所不可比拟的优点,可取代传统的PCR法用于中国汉族人群的HLA-B27的基因分型,辅助强直性脊柱炎等脊柱关节病的诊断.
目的:建立一種快速、靈敏的實時熒光聚閤酶鏈反應(PCR)對中國漢族人群的人白細胞抗原B27(HLA-B27)進行基因分型.方法:採用SYBR GreenⅠ熒光PCR法對120例已定型的標本、230例健康誌願者、54例類風濕因子(RF)暘性患者和36例抗覈抗體(ANA)暘性患者的HLA-B27 DNA進行實時檢測,併採用鎔解麯線對HLA-B27進行基因分型.結果:①鎔解麯線分析顯示,β珠蛋白PCR產物的Tm平均值為87.82℃,HLA-B27 PCR產物的Tm平均值為90.54℃,HLA-B27陰性標本僅在87.82℃處存在β珠蛋白的鎔解麯線峰,而暘性標本則于87.82℃和90.54℃處齣現兩箇鎔解麯線峰,且ΔTm約為2.72℃;②對120箇已定型的標本,SYBR GreenⅠ實時熒光PCR法與傳統的PCR-SSP(序列特異性引物)結果完全吻閤;③健康誌願者、RF暘性患者和ANA暘性患者HLA-B27 DNA暘性率分彆為2.6%(6/230)、5.7%(2/54)和5.6%(2/36).結論:SYBR Green Ⅰ實時熒光PCR法是一種快速、靈敏的HLA-B27基因分型方法,具有傳統的PCR所不可比擬的優點,可取代傳統的PCR法用于中國漢族人群的HLA-B27的基因分型,輔助彊直性脊柱炎等脊柱關節病的診斷.
목적:건립일충쾌속、령민적실시형광취합매련반응(PCR)대중국한족인군적인백세포항원B27(HLA-B27)진행기인분형.방법:채용SYBR GreenⅠ형광PCR법대120례이정형적표본、230례건강지원자、54례류풍습인자(RF)양성환자화36례항핵항체(ANA)양성환자적HLA-B27 DNA진행실시검측,병채용용해곡선대HLA-B27진행기인분형.결과:①용해곡선분석현시,β주단백PCR산물적Tm평균치위87.82℃,HLA-B27 PCR산물적Tm평균치위90.54℃,HLA-B27음성표본부재87.82℃처존재β주단백적용해곡선봉,이양성표본칙우87.82℃화90.54℃처출현량개용해곡선봉,차ΔTm약위2.72℃;②대120개이정형적표본,SYBR GreenⅠ실시형광PCR법여전통적PCR-SSP(서렬특이성인물)결과완전문합;③건강지원자、RF양성환자화ANA양성환자HLA-B27 DNA양성솔분별위2.6%(6/230)、5.7%(2/54)화5.6%(2/36).결론:SYBR Green Ⅰ실시형광PCR법시일충쾌속、령민적HLA-B27기인분형방법,구유전통적PCR소불가비의적우점,가취대전통적PCR법용우중국한족인군적HLA-B27적기인분형,보조강직성척주염등척주관절병적진단.
