化工进展
化工進展
화공진전
CHEMICAL INDUSTRY AND ENGINEERING PROGRESS
2009年
1期
135-140
,共6页
李东华%王鸿%孙汉栋%易喻%应国清
李東華%王鴻%孫漢棟%易喻%應國清
리동화%왕홍%손한동%역유%응국청
超氧化物歧化酶%化学修饰%离子交换层析%金属鳌合层析%耦合过程
超氧化物歧化酶%化學脩飾%離子交換層析%金屬鼇閤層析%耦閤過程
초양화물기화매%화학수식%리자교환층석%금속오합층석%우합과정
以超氧化物歧化酶(supcroxide dismutase,SOD)为模板蛋白,将其分离纯化过程和修饰过程耦合起来,从而获得比活更高、稳定性更好的修饰SOD.将SOD选择性地吸附在DEAE-52层析柱和铜离子螯合葡聚糖凝胶柱上,先不经洗脱分离,直接用活化的聚乙二醇(PEG)5000对吸附在柱上的SOD进行化学修饰,再通过特异性洗脱分离获得PEG-SOD,使SOD分离纯化和修饰过程同步完成.SOD通过离子交换吸附层析-PEG修饰耦合过程和金属螯合层析-PEG修饰耦合过程,所得的PEG-SOD比活力分别为9638.0 U/mg和9067.8 U/mg,纯化倍数分别为1.87倍和1.755倍,氨基修饰率分别为35.3%和40.9%.结果表明SOD的分离纯化-化学修饰耦合过程是可行的,且金属螫合层析-修饰耦合过程的效果要优于离子交换吸附层析-修饰耦合过程.
以超氧化物歧化酶(supcroxide dismutase,SOD)為模闆蛋白,將其分離純化過程和脩飾過程耦閤起來,從而穫得比活更高、穩定性更好的脩飾SOD.將SOD選擇性地吸附在DEAE-52層析柱和銅離子螯閤葡聚糖凝膠柱上,先不經洗脫分離,直接用活化的聚乙二醇(PEG)5000對吸附在柱上的SOD進行化學脩飾,再通過特異性洗脫分離穫得PEG-SOD,使SOD分離純化和脩飾過程同步完成.SOD通過離子交換吸附層析-PEG脩飾耦閤過程和金屬螯閤層析-PEG脩飾耦閤過程,所得的PEG-SOD比活力分彆為9638.0 U/mg和9067.8 U/mg,純化倍數分彆為1.87倍和1.755倍,氨基脩飾率分彆為35.3%和40.9%.結果錶明SOD的分離純化-化學脩飾耦閤過程是可行的,且金屬螫閤層析-脩飾耦閤過程的效果要優于離子交換吸附層析-脩飾耦閤過程.
이초양화물기화매(supcroxide dismutase,SOD)위모판단백,장기분리순화과정화수식과정우합기래,종이획득비활경고、은정성경호적수식SOD.장SOD선택성지흡부재DEAE-52층석주화동리자오합포취당응효주상,선불경세탈분리,직접용활화적취을이순(PEG)5000대흡부재주상적SOD진행화학수식,재통과특이성세탈분리획득PEG-SOD,사SOD분리순화화수식과정동보완성.SOD통과리자교환흡부층석-PEG수식우합과정화금속오합층석-PEG수식우합과정,소득적PEG-SOD비활력분별위9638.0 U/mg화9067.8 U/mg,순화배수분별위1.87배화1.755배,안기수식솔분별위35.3%화40.9%.결과표명SOD적분리순화-화학수식우합과정시가행적,차금속석합층석-수식우합과정적효과요우우리자교환흡부층석-수식우합과정.
