CAJ | 학술논문

目的:建立白细胞滤器(Plasmodipur)联合Percoll密度梯度离心浓集纯化红内期间日疟原虫(P.v)的方法.分析和比较皂素与冻融两种处理方法制备的P.v抗原与P.v感染者混合血清免疫反应性的差别.方法:P.v感染者血样,用Plasmodipur滤器分离去除白细胞,经60%Percoll浓集其中的感染红细胞(iRBC).采用皂素法和冻融法从iRBC中释放疟原虫,经超声粉碎,所获P.v可溶性抗原和同样处理的正常红细胞(nRBC)成分经SDS-PAGE电泳分析其组分差别,并应用P.v感染者、正常对照混合血清与相应的抗原进行免疫印迹分析,确定具有免疫原性的抗原组分.结果:115例P.v感染者血样,用Plasmodipur滤器分离去除白细胞,每10个油镜视野中WBC残留≤5个99例(86.1%),经60%Percoll浓集的35例样本中,共有30例(85.7%)能提高iRBC比例至60%以上.SDS-PAGE电泳分析,皂素处理与冻融处理的P.v抗原分别显示出6条和2条P.v特异性蛋白条带.免疫印迹分析表明,P.v感染者混合血清能特异性地识别22、24.5、29、35、36 kDa皂素处理的P.v抗原,26、49、59、63、115、120 kDa冻融处理的P.v抗原.结论:血样中疟原虫皂素与冻融两种处理方法制备的P.v抗原与P.v感染者混合血清免疫反应性存在明显差异,其中皂素处理的22 kDa抗原组分具有较强的免疫原性,其作为P.v特异性诊断抗原的价值有待进一步研究.
목적:건립백세포려기(Plasmodipur)연합Percoll밀도제도리심농집순화홍내기간일학원충(P.v)적방법.분석화비교조소여동융량충처리방법제비적P.v항원여P.v감염자혼합혈청면역반응성적차별.방법:P.v감염자혈양,용Plasmodipur려기분리거제백세포,경60%Percoll농집기중적감염홍세포(iRBC).채용조소법화동융법종iRBC중석방학원충,경초성분쇄,소획P.v가용성항원화동양처리적정상홍세포(nRBC)성분경SDS-PAGE전영분석기조분차별,병응용P.v감염자、정상대조혼합혈청여상응적항원진행면역인적분석,학정구유면역원성적항원조분.결과:115례P.v감염자혈양,용Plasmodipur려기분리거제백세포,매10개유경시야중WBC잔류≤5개99례(86.1%),경60%Percoll농집적35례양본중,공유30례(85.7%)능제고iRBC비례지60%이상.SDS-PAGE전영분석,조소처리여동융처리적P.v항원분별현시출6조화2조P.v특이성단백조대.면역인적분석표명,P.v감염자혼합혈청능특이성지식별22、24.5、29、35、36 kDa조소처리적P.v항원,26、49、59、63、115、120 kDa동융처리적P.v항원.결론:혈양중학원충조소여동융량충처리방법제비적P.v항원여P.v감염자혼합혈청면역반응성존재명현차이,기중조소처리적22 kDa항원조분구유교강적면역원성,기작위P.v특이성진단항원적개치유대진일보연구.