用强化接种后的特殊PBMC和改良永生化技术制备人源抗HBs
용강화접충후적특수PBMC화개량영생화기술제비인원항HBs
Preparation of human anti-HBs from volunteers with hepatitis B vaccine boost vaccination by modified B-cell immortalization technique
  • 万方数据
    南方医科大学学报 남방의과대학학보
    JOURNAL OF SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY
    2010年 5期 949-952 ,共4页

    娄海波%周元平%周福元%张明霞%魏君锋%曾艳丽%王俊洁%王燕军%吴爱华%侯金林

    루해파%주원평%주복원%장명하%위군봉%증염려%왕준길%왕연군%오애화%후금림

    B细胞永生化%人源单克隆抗体%乙型肝炎表面抗体 B細胞永生化%人源單剋隆抗體%乙型肝炎錶麵抗體
    B세포영생화%인원단극륭항체%을형간염표면항체
    目的 建立乙肝表面抗体(抗HBs)阳性者EBV永生化的B淋巴母细胞系(B-LCLs),筛选、获得人源抗HBs及其分泌细胞.方法 常规技术获得乙肝疫苗强化免疫后志愿者的特异性外周血单核细胞(PBMC),EBV转染,加入CpGDNA免疫调节基序诱导B淋巴细胞增殖,环孢菌素A(CyA)抑制T淋巴细胞活性.雅培法定量动态检测水生化细胞培养上清中的抗HBs滴度,取高滴度抗HBs孔的B-LCLs细胞有限稀释法培养.用免疫组化SP法观察细胞分化状况及抗HBs表达.结果 成功构建了分泌抗HBs的永生化.B-LCLs;培养上清抗HBs滴度维持较高水平3周左右,之后逐渐降低;免疫组化鉴定B-LCLs细胞培养3个月时,永生化细胞仍然为抗HBs合成细胞.结论 采用改进的EBV永生化技术转化强化接种后获得的特殊PBMC,可高效获得永生化的B-LCLs,并有效表达抗HBs.
    목적 건립을간표면항체(항HBs)양성자EBV영생화적B림파모세포계(B-LCLs),사선、획득인원항HBs급기분비세포.방법 상규기술획득을간역묘강화면역후지원자적특이성외주혈단핵세포(PBMC),EBV전염,가입CpGDNA면역조절기서유도B림파세포증식,배포균소A(CyA)억제T림파세포활성.아배법정량동태검측수생화세포배양상청중적항HBs적도,취고적도항HBs공적B-LCLs세포유한희석법배양.용면역조화SP법관찰세포분화상황급항HBs표체.결과 성공구건료분비항HBs적영생화.B-LCLs;배양상청항HBs적도유지교고수평3주좌우,지후축점강저;면역조화감정B-LCLs세포배양3개월시,영생화세포잉연위항HBs합성세포.결론 채용개진적EBV영생화기술전화강화접충후획득적특수PBMC,가고효획득영생화적B-LCLs,병유효표체항HBs.
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