南方医科大学学报
南方醫科大學學報
남방의과대학학보
JOURNAL OF SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY
2011年
6期
1023-1028
,共6页
种树彬%曾抗%李国锋%任非%朱晓亮%周金洁
種樹彬%曾抗%李國鋒%任非%硃曉亮%週金潔
충수빈%증항%리국봉%임비%주효량%주금길
鬼臼毒素%纳米结构脂质载体%细胞凋亡%永生化人宫颈上皮细胞
鬼臼毒素%納米結構脂質載體%細胞凋亡%永生化人宮頸上皮細胞
귀구독소%납미결구지질재체%세포조망%영생화인궁경상피세포
目的 研究鬼臼毒素纳米脂质载体(POD-NLC)的体外对HPV感染的永生化人宫颈上皮细胞的作用.方法 采用乳化蒸发法制备POD-NLC,分别应用扫描电镜、粒径仪、高效液相法等方法研究其表征,并观察其稳定性.分别以不同浓度(0.0001~1 μg/ml)的POD-NLC和鬼臼毒素(POD)处理H8细胞,采用MTT法检测细胞的增殖活性,以荧光显微镜观察细胞的形态变化,流式细胞术(FCM)检测其凋亡率和细胞周期.结果 ①制备的POD-NLC扫描电镜下呈球形,有较好的稳定性,粒径为(85.6±10.25)nm,电位为(26.2±4.1)mV,包封率为(88.56±3.1)%;②POD-NLC能较强地抑制H8细胞的增殖,其抑制作用呈现时间和剂量依赖性;POD-NLC和POD作用72 h对H8细胞的抑制率最高分别为95.8%、65.6%,半数抑制浓度(IC50)分别为0.015、0.13 μg/ml;空白NLC对H8细胞的增殖无影响;③浓度为0.01 μg/ml的POD-NLC和POD分别处理H8细胞48 h后,H8细胞的凋亡率分别为(88.30±4.28)%和(59.95±3.26)%;荧光显微镜观察,均出现了核固缩、染色质高度凝聚、凋亡小体等典型的凋亡形态改变;与空白对照组相比,POD-NLC组和POD组G2/M期细胞比例明显增多,S期细胞比例无明显变化,G0/G1期细胞比例明显减少,但两组间细胞周期时相比例的差异无统计学意义(P>0.05).结论 该制备工艺可行;与POD相比,POD-NLC对H8细胞具有更强的增殖抑制和凋亡诱导效果,可使细胞阻滞于G2/M期,显示出良好的抗宫颈HPV感染的效果.
目的 研究鬼臼毒素納米脂質載體(POD-NLC)的體外對HPV感染的永生化人宮頸上皮細胞的作用.方法 採用乳化蒸髮法製備POD-NLC,分彆應用掃描電鏡、粒徑儀、高效液相法等方法研究其錶徵,併觀察其穩定性.分彆以不同濃度(0.0001~1 μg/ml)的POD-NLC和鬼臼毒素(POD)處理H8細胞,採用MTT法檢測細胞的增殖活性,以熒光顯微鏡觀察細胞的形態變化,流式細胞術(FCM)檢測其凋亡率和細胞週期.結果 ①製備的POD-NLC掃描電鏡下呈毬形,有較好的穩定性,粒徑為(85.6±10.25)nm,電位為(26.2±4.1)mV,包封率為(88.56±3.1)%;②POD-NLC能較彊地抑製H8細胞的增殖,其抑製作用呈現時間和劑量依賴性;POD-NLC和POD作用72 h對H8細胞的抑製率最高分彆為95.8%、65.6%,半數抑製濃度(IC50)分彆為0.015、0.13 μg/ml;空白NLC對H8細胞的增殖無影響;③濃度為0.01 μg/ml的POD-NLC和POD分彆處理H8細胞48 h後,H8細胞的凋亡率分彆為(88.30±4.28)%和(59.95±3.26)%;熒光顯微鏡觀察,均齣現瞭覈固縮、染色質高度凝聚、凋亡小體等典型的凋亡形態改變;與空白對照組相比,POD-NLC組和POD組G2/M期細胞比例明顯增多,S期細胞比例無明顯變化,G0/G1期細胞比例明顯減少,但兩組間細胞週期時相比例的差異無統計學意義(P>0.05).結論 該製備工藝可行;與POD相比,POD-NLC對H8細胞具有更彊的增殖抑製和凋亡誘導效果,可使細胞阻滯于G2/M期,顯示齣良好的抗宮頸HPV感染的效果.
목적 연구귀구독소납미지질재체(POD-NLC)적체외대HPV감염적영생화인궁경상피세포적작용.방법 채용유화증발법제비POD-NLC,분별응용소묘전경、립경의、고효액상법등방법연구기표정,병관찰기은정성.분별이불동농도(0.0001~1 μg/ml)적POD-NLC화귀구독소(POD)처리H8세포,채용MTT법검측세포적증식활성,이형광현미경관찰세포적형태변화,류식세포술(FCM)검측기조망솔화세포주기.결과 ①제비적POD-NLC소묘전경하정구형,유교호적은정성,립경위(85.6±10.25)nm,전위위(26.2±4.1)mV,포봉솔위(88.56±3.1)%;②POD-NLC능교강지억제H8세포적증식,기억제작용정현시간화제량의뢰성;POD-NLC화POD작용72 h대H8세포적억제솔최고분별위95.8%、65.6%,반수억제농도(IC50)분별위0.015、0.13 μg/ml;공백NLC대H8세포적증식무영향;③농도위0.01 μg/ml적POD-NLC화POD분별처리H8세포48 h후,H8세포적조망솔분별위(88.30±4.28)%화(59.95±3.26)%;형광현미경관찰,균출현료핵고축、염색질고도응취、조망소체등전형적조망형태개변;여공백대조조상비,POD-NLC조화POD조G2/M기세포비례명현증다,S기세포비례무명현변화,G0/G1기세포비례명현감소,단량조간세포주기시상비례적차이무통계학의의(P>0.05).결론 해제비공예가행;여POD상비,POD-NLC대H8세포구유경강적증식억제화조망유도효과,가사세포조체우G2/M기,현시출량호적항궁경HPV감염적효과.