CAJ | 학술논문

工程菌株的遗传稳定性在目的产物的生产应用中至关重要.为了确定工程菌株的遗传稳定性,通过对重组别藻蓝蛋白β亚基(His-βAPC)生产菌株 E.coil JM109(DE23)/pET28α-βAPC进行了菌体生长量的测定,平板划线,质粒酶切,产物鉴定等研究,检验了该工程菌质粒的稳定性.通过实验得到如下结果:该工程菌株在没有抗生素选择压力下传代.质粒丢失率为5代6%,10代8%,15代9%,20代15%;该菌株经固体平板连续划线传代20次后,菌落大小和形态基本不变;质粒经BamH Ⅰ和HindⅢ酶切后进行琼脂糖凝胶电泳结果显示该菌株携带的重组质粒目的片段在传代前后没有发生变化;经诱导培养后,His-βAPC在原代和第5、10、15和20代宿主菌中都可以表达,表达量没有明显差别,且表达产物在SDS-PAGE中的带型基本一致.以上结果表明,该工程菌质粒具有结构稳定性和分裂不稳定性.
공정균주적유전은정성재목적산물적생산응용중지관중요.위료학정공정균주적유전은정성,통과대중조별조람단백β아기(His-βAPC)생산균주 E.coil JM109(DE23)/pET28α-βAPC진행료균체생장량적측정,평판화선,질립매절,산물감정등연구,검험료해공정균질립적은정성.통과실험득도여하결과:해공정균주재몰유항생소선택압력하전대.질립주실솔위5대6%,10대8%,15대9%,20대15%;해균주경고체평판련속화선전대20차후,균락대소화형태기본불변;질립경BamH Ⅰ화HindⅢ매절후진행경지당응효전영결과현시해균주휴대적중조질립목적편단재전대전후몰유발생변화;경유도배양후,His-βAPC재원대화제5、10、15화20대숙주균중도가이표체,표체량몰유명현차별,차표체산물재SDS-PAGE중적대형기본일치.이상결과표명,해공정균질립구유결구은정성화분렬불은정성.