SYBRGreenⅠ染料法定量PCR用于人体疟原虫定量检测及虫种鉴别的研究
SYBRGreenⅠ염료법정량PCR용우인체학원충정량검측급충충감별적연구
Quantitative detection and species identificaton of human Plasmodium spp.by using SYBR Green Ⅰ based real-time PCR
  • 万方数据
    中国血吸虫病防治杂志 중국혈흡충병방치잡지
    CHINESE JOURNAL OF SCHISTOSOMIASIS CONTROL
    2011年 6期 677-681 ,共5页

    汪圣强%周华云%李宗%刘耀宝%傅旭峰%朱京京%曹俊%高琪

    왕골강%주화운%리종%류요보%부욱봉%주경경%조준%고기

    疟原虫%定量检测%虫种鉴别%荧光定量PCR 瘧原蟲%定量檢測%蟲種鑒彆%熒光定量PCR
    학원충%정량검측%충충감별%형광정량PCR
    目的 建立一种可用于疟原虫检测并同时鉴别虫种的荧光定量PCR方法.方法 根据人体疟原虫18SrRNA基因序列特征,在疟原虫种特异性区域两侧的属特异性保守区设计引物,对4种人体疟原虫进行PCR扩增,将得到的扩增产物采用TA克隆法插入pGEM-T载体制备标准质粒,用于制备标准曲线进行定量分析,并进行熔解曲线分析,测定各虫种扩增产物的熔解温度.结果 4种人体疟原虫均能扩增得到特异性片断,荧光定量PCR方法中建立的标准曲线相关关系较好(相关系数r =-1.00),熔解曲线分析结果显示,4种人体疟原虫的熔解温度相差较大,分别为三日疟原虫71.3℃、恶性疟原虫72.8℃、卵形疟原虫74.6℃和间日疟原虫75.8℃.结论 建立的SYBR Green Ⅰ染料法荧光定量PCR技术可同时进行人体疟原虫的定量检测和虫种鉴别.
    목적 건립일충가용우학원충검측병동시감별충충적형광정량PCR방법.방법 근거인체학원충18SrRNA기인서렬특정,재학원충충특이성구역량측적속특이성보수구설계인물,대4충인체학원충진행PCR확증,장득도적확증산물채용TA극륭법삽입pGEM-T재체제비표준질립,용우제비표준곡선진행정량분석,병진행용해곡선분석,측정각충충확증산물적용해온도.결과 4충인체학원충균능확증득도특이성편단,형광정량PCR방법중건립적표준곡선상관관계교호(상관계수r =-1.00),용해곡선분석결과현시,4충인체학원충적용해온도상차교대,분별위삼일학원충71.3℃、악성학원충72.8℃、란형학원충74.6℃화간일학원충75.8℃.결론 건립적SYBR Green Ⅰ염료법형광정량PCR기술가동시진행인체학원충적정량검측화충충감별.
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