中华老年医学杂志
中華老年醫學雜誌
중화노년의학잡지
Chinese Journal of Geriatrics
2007年
7期
524-528
,共5页
叶民%陈生弟%张宇红%汪锡金%陆国强%梁梁%徐洁懿
葉民%陳生弟%張宇紅%汪錫金%陸國彊%樑樑%徐潔懿
협민%진생제%장우홍%왕석금%륙국강%량량%서길의
基因疗法%骨髓移植%帕金森病
基因療法%骨髓移植%帕金森病
기인요법%골수이식%파금삼병
目的 研究转染neurturin基因(NTN)的骨髓基质细胞(BMSCs)移植治疗帕金森病模型大鼠,并探讨其治疗机制.方法 将建模成功的帕金森病模型大鼠分为3组,将转染NTN基因的BMSCs(转基因组)、未转染NTN基因含空质粒的BMSCs(空质粒组)和生理盐水(生理盐水组)分别注入模型大鼠右侧的纹状体,在治疗后1~6个月分别观察大鼠阿朴吗啡诱导的旋转行为的变化.移植后第1个月分别进行大鼠脑冰冻切片荧光免疫组织化学鉴定[免疫荧光检测绿色荧光蛋白(GFP)分别与NTN(GFP/NTN)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)(GFP/GFAP)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)(GFP/NSE)和酪氨酸羟化酶(TH)(GFP/TH)双标细胞]及检测1~6个月脑切片免疫组织化学TH阳性细胞并计数.原位杂交和蛋白印记法分别检测NTN在移植大鼠脑中mRNA和蛋白的表达.结果 细胞移植后第1、2、3个月,转基因组大鼠的旋转次数[分别为(12.9±4.7)r/min、(9.4±3.3)r/min和(8.0±3.4)r/min]少于空质粒组[分别为(14.1±4.3)r/min、(12.5±4.8)r/min和(10.6±3.7)r/min],而这两组在1~6个月的旋转次数均少与生理盐水组[分别为(15.1±4.2)r/min、(14.5±3.6)r/min、(13.8±3.7)r/min、(13.1±3.0)r/min、(12.9±2.8)r/min和(12.6±3.1)r/min](P<0.05);在移植后第1个月转基因组大鼠移植区可见GFP/NTN、GFP/GFAP、GFP/NSE双标的细胞,未发现GFP/TH双标的细胞.结论 转基因组治疗帕金森病模型大鼠的总体疗效好于空质粒组和生理盐水组.
目的 研究轉染neurturin基因(NTN)的骨髓基質細胞(BMSCs)移植治療帕金森病模型大鼠,併探討其治療機製.方法 將建模成功的帕金森病模型大鼠分為3組,將轉染NTN基因的BMSCs(轉基因組)、未轉染NTN基因含空質粒的BMSCs(空質粒組)和生理鹽水(生理鹽水組)分彆註入模型大鼠右側的紋狀體,在治療後1~6箇月分彆觀察大鼠阿樸嗎啡誘導的鏇轉行為的變化.移植後第1箇月分彆進行大鼠腦冰凍切片熒光免疫組織化學鑒定[免疫熒光檢測綠色熒光蛋白(GFP)分彆與NTN(GFP/NTN)、膠質纖維痠性蛋白(GFAP)(GFP/GFAP)、神經元特異性烯醇化酶(NSE)(GFP/NSE)和酪氨痠羥化酶(TH)(GFP/TH)雙標細胞]及檢測1~6箇月腦切片免疫組織化學TH暘性細胞併計數.原位雜交和蛋白印記法分彆檢測NTN在移植大鼠腦中mRNA和蛋白的錶達.結果 細胞移植後第1、2、3箇月,轉基因組大鼠的鏇轉次數[分彆為(12.9±4.7)r/min、(9.4±3.3)r/min和(8.0±3.4)r/min]少于空質粒組[分彆為(14.1±4.3)r/min、(12.5±4.8)r/min和(10.6±3.7)r/min],而這兩組在1~6箇月的鏇轉次數均少與生理鹽水組[分彆為(15.1±4.2)r/min、(14.5±3.6)r/min、(13.8±3.7)r/min、(13.1±3.0)r/min、(12.9±2.8)r/min和(12.6±3.1)r/min](P<0.05);在移植後第1箇月轉基因組大鼠移植區可見GFP/NTN、GFP/GFAP、GFP/NSE雙標的細胞,未髮現GFP/TH雙標的細胞.結論 轉基因組治療帕金森病模型大鼠的總體療效好于空質粒組和生理鹽水組.
목적 연구전염neurturin기인(NTN)적골수기질세포(BMSCs)이식치료파금삼병모형대서,병탐토기치료궤제.방법 장건모성공적파금삼병모형대서분위3조,장전염NTN기인적BMSCs(전기인조)、미전염NTN기인함공질립적BMSCs(공질립조)화생리염수(생리염수조)분별주입모형대서우측적문상체,재치료후1~6개월분별관찰대서아박마배유도적선전행위적변화.이식후제1개월분별진행대서뇌빙동절편형광면역조직화학감정[면역형광검측록색형광단백(GFP)분별여NTN(GFP/NTN)、효질섬유산성단백(GFAP)(GFP/GFAP)、신경원특이성희순화매(NSE)(GFP/NSE)화락안산간화매(TH)(GFP/TH)쌍표세포]급검측1~6개월뇌절편면역조직화학TH양성세포병계수.원위잡교화단백인기법분별검측NTN재이식대서뇌중mRNA화단백적표체.결과 세포이식후제1、2、3개월,전기인조대서적선전차수[분별위(12.9±4.7)r/min、(9.4±3.3)r/min화(8.0±3.4)r/min]소우공질립조[분별위(14.1±4.3)r/min、(12.5±4.8)r/min화(10.6±3.7)r/min],이저량조재1~6개월적선전차수균소여생리염수조[분별위(15.1±4.2)r/min、(14.5±3.6)r/min、(13.8±3.7)r/min、(13.1±3.0)r/min、(12.9±2.8)r/min화(12.6±3.1)r/min](P<0.05);재이식후제1개월전기인조대서이식구가견GFP/NTN、GFP/GFAP、GFP/NSE쌍표적세포,미발현GFP/TH쌍표적세포.결론 전기인조치료파금삼병모형대서적총체료효호우공질립조화생리염수조.