目的:观察小鼠单核细胞在体外经内毒素刺激分泌血栓素B2的情况,及不同浓度玉竹提取物A对其分泌量的影响.方法:实验于2004-06/2004-08在锦州医学院免疫实验室进行.选择普通级健康雄性昆明小鼠36只,随机分为正常对照组、模型对照组、玉竹提取物A 500mg/L组、玉竹提取物A 1 000 mg/L组、玉竹提取物A 1500mg/L组,玉竹提取物A 2 000mg/L组共6组,每组6只.36只小鼠摘眼球取血,分离外周血单核细胞,分置24孔培养板中,每孔 0.5 mL.每组设6个平行孔,大肠杆菌内毒素为终浓度.正常对照组每孔加完全1640 0.5 mL;模型对照组同样每孔加完全1640 0.5 mL;同时4个实验组的单核细胞内分别加入相应浓度的玉竹提取物A;另取两个24孔培养板,每孔只加单核细胞悬液1 mL.上述分离之单核细胞培养3 d后换液1次,除正常对照组外,将10 mg/L的大肠杆菌内毒素10μL加入其余5组,共育2 h;同时取只加单核细胞悬液的后两板,每组加大肠杆菌内毒素浓度分别为0.01,0.1,1,10,100,400mg/L,各10μL,共育2 h.然后收集每孔上清液,放免分析法测定上清液中血栓素B2含量.观察体外给予不同浓度大肠杆菌内毒素,对血栓素B2分泌量的影响;不同浓度玉竹提取物A对同一浓度大肠杆菌内毒素刺激的血栓素B2分泌量的影响.结果:36只小鼠均进入结果分析.①大肠杆菌内毒素维持在0.01,0.1,1,10 mg/L时,其刺激小鼠外周血单核细胞合成血栓素B2水平呈剂量依赖关系,即随大肠杆菌内毒素浓度增加,血栓素B2合成水平亦升高(800,950,1 180,1 500 ng/L),大肠杆菌内毒素为10 mg/L时,刺激血栓素B2合成速率达峰值;当内毒素刺激量增至100,400 mg/L时,血栓素B2合成水平不再升高,而呈下降趋势(1 100,900ng/L).②当用10 mg/L的大肠杆菌内毒素分别刺激除正常对照组外的其余5组的单核细胞时,模型对照组血栓素B2分泌量明显高于正常对照组[(1 382±98),(823±78)ng/L,t=10.93,P＜0.01],4个浓度(500,1 000,2 000,4 000mg/L)玉竹提取物A组血栓素B2的量明显低于模型对照组[(805±75),(812±77),(817±81),(783±70),(1382±98)ng/L,t=11.45,11.20,10.88,12.18,＜0.01],与正常对照组(823±78)ng/L无显著差异.结论:内毒素体外可以刺激单核细胞分泌血栓素B2,且刺激量为10 mg/L时,单核细胞合成血栓素B2最旺盛;不同浓度玉竹提取物A体外均可显著抑制血栓素B2的分泌,但随着药物浓度的增大,其抑制作用并未增强.
目的:觀察小鼠單覈細胞在體外經內毒素刺激分泌血栓素B2的情況,及不同濃度玉竹提取物A對其分泌量的影響.方法:實驗于2004-06/2004-08在錦州醫學院免疫實驗室進行.選擇普通級健康雄性昆明小鼠36隻,隨機分為正常對照組、模型對照組、玉竹提取物A 500mg/L組、玉竹提取物A 1 000 mg/L組、玉竹提取物A 1500mg/L組,玉竹提取物A 2 000mg/L組共6組,每組6隻.36隻小鼠摘眼毬取血,分離外週血單覈細胞,分置24孔培養闆中,每孔 0.5 mL.每組設6箇平行孔,大腸桿菌內毒素為終濃度.正常對照組每孔加完全1640 0.5 mL;模型對照組同樣每孔加完全1640 0.5 mL;同時4箇實驗組的單覈細胞內分彆加入相應濃度的玉竹提取物A;另取兩箇24孔培養闆,每孔隻加單覈細胞懸液1 mL.上述分離之單覈細胞培養3 d後換液1次,除正常對照組外,將10 mg/L的大腸桿菌內毒素10μL加入其餘5組,共育2 h;同時取隻加單覈細胞懸液的後兩闆,每組加大腸桿菌內毒素濃度分彆為0.01,0.1,1,10,100,400mg/L,各10μL,共育2 h.然後收集每孔上清液,放免分析法測定上清液中血栓素B2含量.觀察體外給予不同濃度大腸桿菌內毒素,對血栓素B2分泌量的影響;不同濃度玉竹提取物A對同一濃度大腸桿菌內毒素刺激的血栓素B2分泌量的影響.結果:36隻小鼠均進入結果分析.①大腸桿菌內毒素維持在0.01,0.1,1,10 mg/L時,其刺激小鼠外週血單覈細胞閤成血栓素B2水平呈劑量依賴關繫,即隨大腸桿菌內毒素濃度增加,血栓素B2閤成水平亦升高(800,950,1 180,1 500 ng/L),大腸桿菌內毒素為10 mg/L時,刺激血栓素B2閤成速率達峰值;噹內毒素刺激量增至100,400 mg/L時,血栓素B2閤成水平不再升高,而呈下降趨勢(1 100,900ng/L).②噹用10 mg/L的大腸桿菌內毒素分彆刺激除正常對照組外的其餘5組的單覈細胞時,模型對照組血栓素B2分泌量明顯高于正常對照組[(1 382±98),(823±78)ng/L,t=10.93,P＜0.01],4箇濃度(500,1 000,2 000,4 000mg/L)玉竹提取物A組血栓素B2的量明顯低于模型對照組[(805±75),(812±77),(817±81),(783±70),(1382±98)ng/L,t=11.45,11.20,10.88,12.18,＜0.01],與正常對照組(823±78)ng/L無顯著差異.結論:內毒素體外可以刺激單覈細胞分泌血栓素B2,且刺激量為10 mg/L時,單覈細胞閤成血栓素B2最旺盛;不同濃度玉竹提取物A體外均可顯著抑製血栓素B2的分泌,但隨著藥物濃度的增大,其抑製作用併未增彊.
목적:관찰소서단핵세포재체외경내독소자격분비혈전소B2적정황,급불동농도옥죽제취물A대기분비량적영향.방법:실험우2004-06/2004-08재금주의학원면역실험실진행.선택보통급건강웅성곤명소서36지,수궤분위정상대조조、모형대조조、옥죽제취물A 500mg/L조、옥죽제취물A 1 000 mg/L조、옥죽제취물A 1500mg/L조,옥죽제취물A 2 000mg/L조공6조,매조6지.36지소서적안구취혈,분리외주혈단핵세포,분치24공배양판중,매공 0.5 mL.매조설6개평행공,대장간균내독소위종농도.정상대조조매공가완전1640 0.5 mL;모형대조조동양매공가완전1640 0.5 mL;동시4개실험조적단핵세포내분별가입상응농도적옥죽제취물A;령취량개24공배양판,매공지가단핵세포현액1 mL.상술분리지단핵세포배양3 d후환액1차,제정상대조조외,장10 mg/L적대장간균내독소10μL가입기여5조,공육2 h;동시취지가단핵세포현액적후량판,매조가대장간균내독소농도분별위0.01,0.1,1,10,100,400mg/L,각10μL,공육2 h.연후수집매공상청액,방면분석법측정상청액중혈전소B2함량.관찰체외급여불동농도대장간균내독소,대혈전소B2분비량적영향;불동농도옥죽제취물A대동일농도대장간균내독소자격적혈전소B2분비량적영향.결과:36지소서균진입결과분석.①대장간균내독소유지재0.01,0.1,1,10 mg/L시,기자격소서외주혈단핵세포합성혈전소B2수평정제량의뢰관계,즉수대장간균내독소농도증가,혈전소B2합성수평역승고(800,950,1 180,1 500 ng/L),대장간균내독소위10 mg/L시,자격혈전소B2합성속솔체봉치;당내독소자격량증지100,400 mg/L시,혈전소B2합성수평불재승고,이정하강추세(1 100,900ng/L).②당용10 mg/L적대장간균내독소분별자격제정상대조조외적기여5조적단핵세포시,모형대조조혈전소B2분비량명현고우정상대조조[(1 382±98),(823±78)ng/L,t=10.93,P＜0.01],4개농도(500,1 000,2 000,4 000mg/L)옥죽제취물A조혈전소B2적량명현저우모형대조조[(805±75),(812±77),(817±81),(783±70),(1382±98)ng/L,t=11.45,11.20,10.88,12.18,＜0.01],여정상대조조(823±78)ng/L무현저차이.결론:내독소체외가이자격단핵세포분비혈전소B2,차자격량위10 mg/L시,단핵세포합성혈전소B2최왕성;불동농도옥죽제취물A체외균가현저억제혈전소B2적분비,단수착약물농도적증대,기억제작용병미증강.
