微生物与感染
微生物與感染
미생물여감염
JOURNAL OF MICROBES AND INFECTION
2006年
3期
149-152
,共4页
汪源%梁久红%董晨%田华%戴星%赵宇%孟继鸿
汪源%樑久紅%董晨%田華%戴星%趙宇%孟繼鴻
왕원%량구홍%동신%전화%대성%조우%맹계홍
戊型肝炎病毒%抗原表位%单克隆抗体%基因型
戊型肝炎病毒%抗原錶位%單剋隆抗體%基因型
무형간염병독%항원표위%단극륭항체%기인형
目的 研究戊型肝炎病毒(HEV)第Ⅳ基因型中国株开放阅读框架(ORF)2编码蛋白p166Chn的抗原表位特征.方法 制备HEV ORF2重组衣壳蛋白p166Chn的特异性单克隆抗体(McAb),进行中和活性鉴定,并利用7种HEV不同基因型p166重组蛋白以及22种N端或C端逐步截短的p166Chn进行酶联免疫吸附试验(ELISA)检测,确定McAb所识别抗原表位的性质和位置.结果 获得1株稳定分泌HEV McAb的杂交瘤细胞株,命名为B4.该McAb不与其他基因型p166重组蛋白反应,不能中和HEV对培养细胞的感染性,也不能竞争抑制已知中和性McAb与抗原p166Chn的结合,表明McAb B4所针对的抗原表位是HEV第Ⅳ基因型特异的非中和性抗原表位.此外,McAb B4能与截短蛋白pN452、pN460、pN462、pN463、pN464、pN465、pN466、pN468、pN470和pN472发生阳性反应,而与pN482、pN492、pC587、pC597、pC599、pC600、pC601、pC603、pC605、pC607、pN465-C601和pN460-C605均不反应.表明其可识别的抗原表位位于472～617位氨基酸,而且N端第472～482位氨基酸以及C端第607～617位氨基酸的1个或多个氨基酸对构成该抗原表位起着重要作用.结论 所发现的HEV第Ⅳ基因型特异性抗原表位是1个非中和性的构象依赖性表位,可定位于pORF2的第472～617位氨基酸.
目的 研究戊型肝炎病毒(HEV)第Ⅳ基因型中國株開放閱讀框架(ORF)2編碼蛋白p166Chn的抗原錶位特徵.方法 製備HEV ORF2重組衣殼蛋白p166Chn的特異性單剋隆抗體(McAb),進行中和活性鑒定,併利用7種HEV不同基因型p166重組蛋白以及22種N耑或C耑逐步截短的p166Chn進行酶聯免疫吸附試驗(ELISA)檢測,確定McAb所識彆抗原錶位的性質和位置.結果 穫得1株穩定分泌HEV McAb的雜交瘤細胞株,命名為B4.該McAb不與其他基因型p166重組蛋白反應,不能中和HEV對培養細胞的感染性,也不能競爭抑製已知中和性McAb與抗原p166Chn的結閤,錶明McAb B4所針對的抗原錶位是HEV第Ⅳ基因型特異的非中和性抗原錶位.此外,McAb B4能與截短蛋白pN452、pN460、pN462、pN463、pN464、pN465、pN466、pN468、pN470和pN472髮生暘性反應,而與pN482、pN492、pC587、pC597、pC599、pC600、pC601、pC603、pC605、pC607、pN465-C601和pN460-C605均不反應.錶明其可識彆的抗原錶位位于472～617位氨基痠,而且N耑第472～482位氨基痠以及C耑第607～617位氨基痠的1箇或多箇氨基痠對構成該抗原錶位起著重要作用.結論 所髮現的HEV第Ⅳ基因型特異性抗原錶位是1箇非中和性的構象依賴性錶位,可定位于pORF2的第472～617位氨基痠.
목적 연구무형간염병독(HEV)제Ⅳ기인형중국주개방열독광가(ORF)2편마단백p166Chn적항원표위특정.방법 제비HEV ORF2중조의각단백p166Chn적특이성단극륭항체(McAb),진행중화활성감정,병이용7충HEV불동기인형p166중조단백이급22충N단혹C단축보절단적p166Chn진행매련면역흡부시험(ELISA)검측,학정McAb소식별항원표위적성질화위치.결과 획득1주은정분비HEV McAb적잡교류세포주,명명위B4.해McAb불여기타기인형p166중조단백반응,불능중화HEV대배양세포적감염성,야불능경쟁억제이지중화성McAb여항원p166Chn적결합,표명McAb B4소침대적항원표위시HEV제Ⅳ기인형특이적비중화성항원표위.차외,McAb B4능여절단단백pN452、pN460、pN462、pN463、pN464、pN465、pN466、pN468、pN470화pN472발생양성반응,이여pN482、pN492、pC587、pC597、pC599、pC600、pC601、pC603、pC605、pC607、pN465-C601화pN460-C605균불반응.표명기가식별적항원표위위우472～617위안기산,이차N단제472～482위안기산이급C단제607～617위안기산적1개혹다개안기산대구성해항원표위기착중요작용.결론 소발현적HEV제Ⅳ기인형특이성항원표위시1개비중화성적구상의뢰성표위,가정위우pORF2적제472～617위안기산.
