遗传
遺傳
유전
HEREDITAS(BEIJING)
2006年
9期
1123-1128
,共6页
朱贵明%陈宏%卢建申%周艳荣%吴晓洁%陈红星%邓继先
硃貴明%陳宏%盧建申%週豔榮%吳曉潔%陳紅星%鄧繼先
주귀명%진굉%로건신%주염영%오효길%진홍성%산계선
基因合成%聚合酶链式反应%ω-3脂肪酸去饱和酶基因
基因閤成%聚閤酶鏈式反應%ω-3脂肪痠去飽和酶基因
기인합성%취합매련식반응%ω-3지방산거포화매기인
人工合成基因在生命科学研究中有着重要的意义,因此基因合成是一项常用技术.长片段基因的合成比较困难,常常因为合成中碱基序列的错配、突变等原因而导致失败.研究者们所熟知的几种现行的方法仍然难以解决该问题.本研究在作者自身的工作经验中建立了一种新的基因合成方法,即PCR-酶切连接法.应用该方法成功地将化学合成的27个寡聚核苷酸片段(每个片段长60～68 bp)拼接组装起来,获得了完整的总长为1 226 bp的基因sFat-1.整个过程仅采用3轮PCR(共7个反应)、2轮的酶切连接(3个反应),而且未曾出现任何偏离预期基因序列的差错.该方法步骤较少,技术简单,出错极少,是合成长基因序列很好的选择.
人工閤成基因在生命科學研究中有著重要的意義,因此基因閤成是一項常用技術.長片段基因的閤成比較睏難,常常因為閤成中堿基序列的錯配、突變等原因而導緻失敗.研究者們所熟知的幾種現行的方法仍然難以解決該問題.本研究在作者自身的工作經驗中建立瞭一種新的基因閤成方法,即PCR-酶切連接法.應用該方法成功地將化學閤成的27箇寡聚覈苷痠片段(每箇片段長60～68 bp)拼接組裝起來,穫得瞭完整的總長為1 226 bp的基因sFat-1.整箇過程僅採用3輪PCR(共7箇反應)、2輪的酶切連接(3箇反應),而且未曾齣現任何偏離預期基因序列的差錯.該方法步驟較少,技術簡單,齣錯極少,是閤成長基因序列很好的選擇.
인공합성기인재생명과학연구중유착중요적의의,인차기인합성시일항상용기술.장편단기인적합성비교곤난,상상인위합성중감기서렬적착배、돌변등원인이도치실패.연구자문소숙지적궤충현행적방법잉연난이해결해문제.본연구재작자자신적공작경험중건립료일충신적기인합성방법,즉PCR-매절련접법.응용해방법성공지장화학합성적27개과취핵감산편단(매개편단장60～68 bp)병접조장기래,획득료완정적총장위1 226 bp적기인sFat-1.정개과정부채용3륜PCR(공7개반응)、2륜적매절련접(3개반응),이차미증출현임하편리예기기인서렬적차착.해방법보취교소,기술간단,출착겁소,시합성장기인서렬흔호적선택.
