硅谷
硅穀
규곡
SILICON VALLEY
2008年
5期
1,95
,共2页
人硒蛋白%原核表达
人硒蛋白%原覈錶達
인서단백%원핵표체
目的:构建硒蛋白SelK的重组表达载体pGEX-6P-1-SelK-GFP.方法:利用PCR、酶切和连接酶连接等技术将硒蛋白selk连接到质粒pGEX-6P-1上,通过酶切、序列测定进行鉴定.通过IPTG诱导重组载体在BL21大肠杆菌中表达,并筛选最适诱导剂浓度和最适诱导时间.结果:成功在大肠杆菌中高效表达带有GST的SelK-GFP融合蛋白,占菌体总蛋白的15%,主要以包涵体形式表达.结论:成功构建了pGEX-6P-1-SelK-GFP重组表达质粒,为进一步研究硒蛋白SelK的功能、抗体制各打下了基础.
目的:構建硒蛋白SelK的重組錶達載體pGEX-6P-1-SelK-GFP.方法:利用PCR、酶切和連接酶連接等技術將硒蛋白selk連接到質粒pGEX-6P-1上,通過酶切、序列測定進行鑒定.通過IPTG誘導重組載體在BL21大腸桿菌中錶達,併篩選最適誘導劑濃度和最適誘導時間.結果:成功在大腸桿菌中高效錶達帶有GST的SelK-GFP融閤蛋白,佔菌體總蛋白的15%,主要以包涵體形式錶達.結論:成功構建瞭pGEX-6P-1-SelK-GFP重組錶達質粒,為進一步研究硒蛋白SelK的功能、抗體製各打下瞭基礎.
목적:구건서단백SelK적중조표체재체pGEX-6P-1-SelK-GFP.방법:이용PCR、매절화련접매련접등기술장서단백selk련접도질립pGEX-6P-1상,통과매절、서렬측정진행감정.통과IPTG유도중조재체재BL21대장간균중표체,병사선최괄유도제농도화최괄유도시간.결과:성공재대장간균중고효표체대유GST적SelK-GFP융합단백,점균체총단백적15%,주요이포함체형식표체.결론:성공구건료pGEX-6P-1-SelK-GFP중조표체질립,위진일보연구서단백SelK적공능、항체제각타하료기출.
