生物工程学报
生物工程學報
생물공정학보
CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY
2008年
2期
262-271
,共10页
张新果%李银心%陈华%石武良
張新果%李銀心%陳華%石武良
장신과%리은심%진화%석무량
活性氧清除剂%耐盐变异体%药蒲公英%叶片外植体
活性氧清除劑%耐鹽變異體%藥蒲公英%葉片外植體
활성양청제제%내염변이체%약포공영%협편외식체
为提高药蒲公英的耐盐性,用 20-30d 大小的药蒲公英叶片诱导愈伤,获得的愈伤以 NaCl 作为选择因子,用直接筛选的方法,每 3 周进行一次继代培养,经3个月继代筛选获得了耐 1.5%NaCl 的药蒲公英愈伤组织,将耐 1.5%NaCl的药蒲公英愈伤组织接种在分化培养基上分化出芽,之后将再生芽转接到生根培养基中进行生根培养,经4个月得到了12 株耐 1.5%NaCl 的药蒲公英再生植株.与野生型相比,耐盐植株叶片宽大、叶柄粗短、叶表面覆盖白色细毛,根粗壮较短,花茎中部具 2 cm 左右的苞叶.RAPD(Random amplified polymorphic DNA,随机扩增的多态性 DNA)和 SDS-PAGE检测表明,耐盐植株与对照植株在 DNA 及蛋白水平上均存在明显差异.1.5%NaCl 处理后,与普通再生植株相比,耐盐株系的抗氧化酶活性明显提高,脯氨酸含量上升幅度更为显著,而丙二醛(MDA)含量降低,其主要药用成分黄酮的含量显著增加.这些结果说明耐盐植株的抗氧化防御能力明显增强.以上结果表明耐 1.5% NaCl 的药蒲公英再生植株为耐1.5%NaCl 药蒲公英变异体,这些耐盐变异体有望成为抗盐耐海水蔬菜家族的新成员.同时,这些耐盐变异体植株比普通植株具有更高的医用商业价值.耐 1.5% NaCl 的药蒲公英再生变异体遗传稳定性的研究正在进行中.
為提高藥蒲公英的耐鹽性,用 20-30d 大小的藥蒲公英葉片誘導愈傷,穫得的愈傷以 NaCl 作為選擇因子,用直接篩選的方法,每 3 週進行一次繼代培養,經3箇月繼代篩選穫得瞭耐 1.5%NaCl 的藥蒲公英愈傷組織,將耐 1.5%NaCl的藥蒲公英愈傷組織接種在分化培養基上分化齣芽,之後將再生芽轉接到生根培養基中進行生根培養,經4箇月得到瞭12 株耐 1.5%NaCl 的藥蒲公英再生植株.與野生型相比,耐鹽植株葉片寬大、葉柄粗短、葉錶麵覆蓋白色細毛,根粗壯較短,花莖中部具 2 cm 左右的苞葉.RAPD(Random amplified polymorphic DNA,隨機擴增的多態性 DNA)和 SDS-PAGE檢測錶明,耐鹽植株與對照植株在 DNA 及蛋白水平上均存在明顯差異.1.5%NaCl 處理後,與普通再生植株相比,耐鹽株繫的抗氧化酶活性明顯提高,脯氨痠含量上升幅度更為顯著,而丙二醛(MDA)含量降低,其主要藥用成分黃酮的含量顯著增加.這些結果說明耐鹽植株的抗氧化防禦能力明顯增彊.以上結果錶明耐 1.5% NaCl 的藥蒲公英再生植株為耐1.5%NaCl 藥蒲公英變異體,這些耐鹽變異體有望成為抗鹽耐海水蔬菜傢族的新成員.同時,這些耐鹽變異體植株比普通植株具有更高的醫用商業價值.耐 1.5% NaCl 的藥蒲公英再生變異體遺傳穩定性的研究正在進行中.
위제고약포공영적내염성,용 20-30d 대소적약포공영협편유도유상,획득적유상이 NaCl 작위선택인자,용직접사선적방법,매 3 주진행일차계대배양,경3개월계대사선획득료내 1.5%NaCl 적약포공영유상조직,장내 1.5%NaCl적약포공영유상조직접충재분화배양기상분화출아,지후장재생아전접도생근배양기중진행생근배양,경4개월득도료12 주내 1.5%NaCl 적약포공영재생식주.여야생형상비,내염식주협편관대、협병조단、협표면복개백색세모,근조장교단,화경중부구 2 cm 좌우적포협.RAPD(Random amplified polymorphic DNA,수궤확증적다태성 DNA)화 SDS-PAGE검측표명,내염식주여대조식주재 DNA 급단백수평상균존재명현차이.1.5%NaCl 처리후,여보통재생식주상비,내염주계적항양화매활성명현제고,포안산함량상승폭도경위현저,이병이철(MDA)함량강저,기주요약용성분황동적함량현저증가.저사결과설명내염식주적항양화방어능력명현증강.이상결과표명내 1.5% NaCl 적약포공영재생식주위내1.5%NaCl 약포공영변이체,저사내염변이체유망성위항염내해수소채가족적신성원.동시,저사내염변이체식주비보통식주구유경고적의용상업개치.내 1.5% NaCl 적약포공영재생변이체유전은정성적연구정재진행중.