南方医科大学学报
南方醫科大學學報
남방의과대학학보
JOURNAL OF SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY
2008年
6期
1031-1034
,共4页
黎振兴%罗雅玲%赖文岩%徐健%任敦强%赵燕霞
黎振興%囉雅玲%賴文巖%徐健%任敦彊%趙燕霞
려진흥%라아령%뢰문암%서건%임돈강%조연하
人气道平滑肌细胞%内皮素-1%迁移%细胞骨架%Rho激酶
人氣道平滑肌細胞%內皮素-1%遷移%細胞骨架%Rho激酶
인기도평활기세포%내피소-1%천이%세포골가%Rho격매
目的 研究Rho激酶信号通路在内皮素-1(ET-1)诱导的人气道平滑肌细胞(ASMCs)迁移及细胞骨架变化中的作用.方法 组织块贴壁法培养人ASMCs,改良的Boyden小室检测ASMCs的迁移能力;激光共聚焦扫描显微镜观察细胞骨架的变化;Western blotting检测ET-1刺激不同时间后Rho激酶底物肌球蛋白磷酸酶目标亚单位1(MYPT1)的磷酸化水平.结果 ET-1在0.1、1、10、100 nmol/L浓度具有趋化ASMCs的迁移能力,10 nmol/L的ET-1趋化ASMCs迁移的能力最强(与对照组相比,P<0.01).Rho激酶抑制剂Y-27632可浓度依赖性地抑制ET-1趋化的ASMCs跨膜迁移,与ET-1组相比,10μmol/L的Y-27632显著抑制了ASMCs迁移(P<0.01);ET-1(10 nmol/L)刺激后ASMCs细胞骨架和形态改变,伪足生成,应力纤维形成增多,Y-27632可显著抑制ET-1诱导的上述改变;ET-1刺激15、30min后p-MYPT1表达显著增高(与对照组相比,P<0.01),随着刺激时间的延长,p-MYPT1表达下降(P>05).结论 Rho激酶信号通路在ET-1诱导的ASMCs迁移和细胞骨架变化中发挥重要的作用.
目的 研究Rho激酶信號通路在內皮素-1(ET-1)誘導的人氣道平滑肌細胞(ASMCs)遷移及細胞骨架變化中的作用.方法 組織塊貼壁法培養人ASMCs,改良的Boyden小室檢測ASMCs的遷移能力;激光共聚焦掃描顯微鏡觀察細胞骨架的變化;Western blotting檢測ET-1刺激不同時間後Rho激酶底物肌毬蛋白燐痠酶目標亞單位1(MYPT1)的燐痠化水平.結果 ET-1在0.1、1、10、100 nmol/L濃度具有趨化ASMCs的遷移能力,10 nmol/L的ET-1趨化ASMCs遷移的能力最彊(與對照組相比,P<0.01).Rho激酶抑製劑Y-27632可濃度依賴性地抑製ET-1趨化的ASMCs跨膜遷移,與ET-1組相比,10μmol/L的Y-27632顯著抑製瞭ASMCs遷移(P<0.01);ET-1(10 nmol/L)刺激後ASMCs細胞骨架和形態改變,偽足生成,應力纖維形成增多,Y-27632可顯著抑製ET-1誘導的上述改變;ET-1刺激15、30min後p-MYPT1錶達顯著增高(與對照組相比,P<0.01),隨著刺激時間的延長,p-MYPT1錶達下降(P>05).結論 Rho激酶信號通路在ET-1誘導的ASMCs遷移和細胞骨架變化中髮揮重要的作用.
목적 연구Rho격매신호통로재내피소-1(ET-1)유도적인기도평활기세포(ASMCs)천이급세포골가변화중적작용.방법 조직괴첩벽법배양인ASMCs,개량적Boyden소실검측ASMCs적천이능력;격광공취초소묘현미경관찰세포골가적변화;Western blotting검측ET-1자격불동시간후Rho격매저물기구단백린산매목표아단위1(MYPT1)적린산화수평.결과 ET-1재0.1、1、10、100 nmol/L농도구유추화ASMCs적천이능력,10 nmol/L적ET-1추화ASMCs천이적능력최강(여대조조상비,P<0.01).Rho격매억제제Y-27632가농도의뢰성지억제ET-1추화적ASMCs과막천이,여ET-1조상비,10μmol/L적Y-27632현저억제료ASMCs천이(P<0.01);ET-1(10 nmol/L)자격후ASMCs세포골가화형태개변,위족생성,응력섬유형성증다,Y-27632가현저억제ET-1유도적상술개변;ET-1자격15、30min후p-MYPT1표체현저증고(여대조조상비,P<0.01),수착자격시간적연장,p-MYPT1표체하강(P>05).결론 Rho격매신호통로재ET-1유도적ASMCs천이화세포골가변화중발휘중요적작용.
