CAJ | 학술논문

背景:目前已有报道证实,电脉冲能诱导癌细胞发生凋亡.目的:测试在不同参数电脉冲处理下人肝癌细胞的凋亡效应以及线粒体跨膜电位变化.设计、时间及地点:对照观察实验,于2007-03/2008-03在重庆大学生物流变科学与技术教育部重点实验室、电气工程学院输酉己电装备及系统安全与新技术国家重点实验室完成.材料:SMMC-7721人肝癌细胞与HL-7702正常人肝细胞均购自中国典型培养物保藏中心.方法:采用场强、脉宽分别为200 V/cm,1.8 μs:250 V/cm,1.8 μs;600 V/cm,120 ns的电脉冲分别处理人正常肝细胞与肝癌细胞1 min,用流式细胞术及DNA Ladder检测2种细胞的凋亡情况;用激光共聚焦显微镜对处理后的细胞线粒体跨膜电位变化进行实时观测.主要观察指标:不同参数电场下SMMC-7721细胞的凋亡率,SMMC-7721在不同参数电场下刺激10 min的线粒体跨膜电位变化.结果:场强200V/cm及250V/cm,脉冲1.8 μs的电场可以诱导肝癌细胞凋亡;120ns,600V/cm的电场未明显诱导癌细胞凋亡.DNA Ladder进一步证实了电脉冲诱导的细胞凋亡效应,但是120 ns,600 V/cm的电脉冲处理下的癌细胞却呈现出更多的DNA片段.对线粒体跨膜电位变化实时观测结果表明,电脉冲的处理降低了癌细胞线粒体跨膜电位,120 ns,600V/cm的电场比1.8 μs,200V/cm及250V/cm的电场更能有效的降低线粒体跨膜电位(67.09%,23.71%,28.44%).结论:细胞的凋亡效应和线粒体跨膜电位的变化依赖于脉宽和场强等电场参数.窄脉冲对胞内结构的作用较宽脉冲更明显,而线粒体跨膜电位的降低并不能直接说明细胞发生了凋亡效应.
배경:목전이유보도증실,전맥충능유도암세포발생조망.목적:측시재불동삼수전맥충처리하인간암세포적조망효응이급선립체과막전위변화.설계、시간급지점:대조관찰실험,우2007-03/2008-03재중경대학생물류변과학여기술교육부중점실험실、전기공정학원수유기전장비급계통안전여신기술국가중점실험실완성.재료:SMMC-7721인간암세포여HL-7702정상인간세포균구자중국전형배양물보장중심.방법:채용장강、맥관분별위200 V/cm,1.8 μs:250 V/cm,1.8 μs;600 V/cm,120 ns적전맥충분별처리인정상간세포여간암세포1 min,용류식세포술급DNA Ladder검측2충세포적조망정황;용격광공취초현미경대처리후적세포선립체과막전위변화진행실시관측.주요관찰지표:불동삼수전장하SMMC-7721세포적조망솔,SMMC-7721재불동삼수전장하자격10 min적선립체과막전위변화.결과:장강200V/cm급250V/cm,맥충1.8 μs적전장가이유도간암세포조망;120ns,600V/cm적전장미명현유도암세포조망.DNA Ladder진일보증실료전맥충유도적세포조망효응,단시120 ns,600 V/cm적전맥충처리하적암세포각정현출경다적DNA편단.대선립체과막전위변화실시관측결과표명,전맥충적처리강저료암세포선립체과막전위,120 ns,600V/cm적전장비1.8 μs,200V/cm급250V/cm적전장경능유효적강저선립체과막전위(67.09%,23.71%,28.44%).결론:세포적조망효응화선립체과막전위적변화의뢰우맥관화장강등전장삼수.착맥충대포내결구적작용교관맥충경명현,이선립체과막전위적강저병불능직접설명세포발생료조망효응.