CAJ | 학술논문

为了研究不同分化程度和转移潜能鼻咽癌(NPC)细胞系膜联蛋白A1(ANXA1)mRNA和蛋白质表达情况及其与基因甲基化的关系.培养NPC细胞系CNE1、CNE2、5-8F、6-10B和永生化非癌性人鼻咽黏膜上皮细胞NP69细胞用于实验,用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)方法检测ANXA1基因甲基化状态,同时利用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测ANXA1基因的mRNA表达水平.然后用不同浓度的5-杂氮-2'-脱氧胞苷(5-aza-2dC)对NPC细胞进行去甲基化处理,MSP和RT-PCR方法检测处理组和对照组细胞ANXA1基因甲基化状况和mRNA表达水平,并用Western-blotting方法检测ANXA1基因蛋白质表达水平.结果发现,NP69细胞ANXA1基因无甲基化,4株NPC细胞系ANXA1基因都存在不同程度的甲基化,甲基化程度与细胞的分化程度和转移潜能相关.NPC细胞ANXA1基因mRNA表达水平降低,低于NP69细胞,其降低的程度与基因的甲基化程度相关.5-aza-2dC能够剂量依赖性地引起ANXA1基因去甲基化,经去甲基化处理后,NPC细胞系ANXA1基因的mRNA和蛋白质的表达水平相应提高.研究证明,NPC细胞系ANXA1基因的mRNA和蛋白质表达水平出现下调,甲基化是导致表达下调的主要原因,5-aza-2dC去甲基化处理能够恢复ANXA1基因的表达水平.
위료연구불동분화정도화전이잠능비인암(NPC)세포계막련단백A1(ANXA1)mRNA화단백질표체정황급기여기인갑기화적관계.배양NPC세포계CNE1、CNE2、5-8F、6-10B화영생화비암성인비인점막상피세포NP69세포용우실험,용갑기화특이성취합매련반응(MSP)방법검측ANXA1기인갑기화상태,동시이용역전록-취합매련반응(RT-PCR)방법검측ANXA1기인적mRNA표체수평.연후용불동농도적5-잡담-2'-탈양포감(5-aza-2dC)대NPC세포진행거갑기화처리,MSP화RT-PCR방법검측처리조화대조조세포ANXA1기인갑기화상황화mRNA표체수평,병용Western-blotting방법검측ANXA1기인단백질표체수평.결과발현,NP69세포ANXA1기인무갑기화,4주NPC세포계ANXA1기인도존재불동정도적갑기화,갑기화정도여세포적분화정도화전이잠능상관.NPC세포ANXA1기인mRNA표체수평강저,저우NP69세포,기강저적정도여기인적갑기화정도상관.5-aza-2dC능구제량의뢰성지인기ANXA1기인거갑기화,경거갑기화처리후,NPC세포계ANXA1기인적mRNA화단백질적표체수평상응제고.연구증명,NPC세포계ANXA1기인적mRNA화단백질표체수평출현하조,갑기화시도치표체하조적주요원인,5-aza-2dC거갑기화처리능구회복ANXA1기인적표체수평.