食品科学
食品科學
식품과학
FOOD SCIENCE
2009年
19期
227-231
,共5页
谷新晰%许文涛%黄昆仑%罗云波%林希谨%陈卓君%田洪涛
穀新晰%許文濤%黃昆崙%囉雲波%林希謹%陳卓君%田洪濤
곡신석%허문도%황곤륜%라운파%림희근%진탁군%전홍도
弹性蛋白酶%诱导表达%纯化%酶学特性
彈性蛋白酶%誘導錶達%純化%酶學特性
탄성단백매%유도표체%순화%매학특성
将已构建好的表达载体pPIC3.5K/PAE转化毕赤酵母KM71,经甲醇诱导表达弹性蛋白酶,通过对发酵条件的初步优化,确定毕赤酵母重组菌株表达的最佳条件为:甲醇浓度1%,最佳诱导时间4d.通过DEAE-SepharoseFF弱阴离子交换柱一步纯化,获得良好的纯化效果.该重组蛋白酶最适pH值范围6.0～8.5,最适温度范围为25～40℃,催化反应条件温和.Ca2+和Mg2+对重组弹性蛋白酶活性有不同程度的促进作用,Zn2+、Cd2+、Mn2+、Fe2+、Co2+、Cu2+和EDTA对该酶有不同程度的抑制作用.
將已構建好的錶達載體pPIC3.5K/PAE轉化畢赤酵母KM71,經甲醇誘導錶達彈性蛋白酶,通過對髮酵條件的初步優化,確定畢赤酵母重組菌株錶達的最佳條件為:甲醇濃度1%,最佳誘導時間4d.通過DEAE-SepharoseFF弱陰離子交換柱一步純化,穫得良好的純化效果.該重組蛋白酶最適pH值範圍6.0～8.5,最適溫度範圍為25～40℃,催化反應條件溫和.Ca2+和Mg2+對重組彈性蛋白酶活性有不同程度的促進作用,Zn2+、Cd2+、Mn2+、Fe2+、Co2+、Cu2+和EDTA對該酶有不同程度的抑製作用.
장이구건호적표체재체pPIC3.5K/PAE전화필적효모KM71,경갑순유도표체탄성단백매,통과대발효조건적초보우화,학정필적효모중조균주표체적최가조건위:갑순농도1%,최가유도시간4d.통과DEAE-SepharoseFF약음리자교환주일보순화,획득량호적순화효과.해중조단백매최괄pH치범위6.0～8.5,최괄온도범위위25～40℃,최화반응조건온화.Ca2+화Mg2+대중조탄성단백매활성유불동정도적촉진작용,Zn2+、Cd2+、Mn2+、Fe2+、Co2+、Cu2+화EDTA대해매유불동정도적억제작용.
