中国药物与临床
中國藥物與臨床
중국약물여림상
CHINESE REMEDIES & CLINICS
2011年
11期
1251-1253
,共3页
邢媛%赵中夫%刘明社%明慧香%宋红娇
邢媛%趙中伕%劉明社%明慧香%宋紅嬌
형원%조중부%류명사%명혜향%송홍교
高迁移率族蛋白质类%肝纤维化%细胞外基质
高遷移率族蛋白質類%肝纖維化%細胞外基質
고천이솔족단백질류%간섬유화%세포외기질
目的 探讨晚期糖基化终末产物受体(RAGE)在高迁移率族蛋白B1(HMGB1)激活肝星状细胞(HSC)中的作用.方法 大鼠HSC-T6细胞系培养至对数生长期,分为5组,对照组加DMEM培养液1 ml;HMGB1组加0.1 μg/ml 的HMGB1 1 ml;抗RAGE组将20 μg/ml RAGE抗体加入培养板2 h后,再加0.1 μg/ml HMGB1;sRAGE组将20 μg/ml sRAGE加入培养板2 h后,再加0.1 μg/ml HMGB1;AGE组:将160 μg/ml AGE 加入培养板2 h后,再加0.1 μg/ml HMGB1.刺激 24 h 后,收集各组上清培养液酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测透明质酸(HA)、Ⅲ型胶原(PⅢP)和Ⅳ型胶原(CⅣ)的含量;小心取出六孔板内载玻片,免疫组织化学法检测α-SMA、转化生长因子(TGF)-β1的表达.结果 抗RAGE组、sRAGE组与HMGB1组相比,HSC细胞质中的α-SMA和TGF-β1表达水平和培养液中HA、PⅢP和CⅣ的含量均显著下降(P<0.05);AGE组与对照组相比,HSC细胞质中的α-SMA和TGF-β1表达水平和培养液中的HA、PIIIP和CⅣ含量均明显增高(P<0.05).结论 HMGB1与RAGE结合,使HSC活化,合成释放细胞外基质增加.
目的 探討晚期糖基化終末產物受體(RAGE)在高遷移率族蛋白B1(HMGB1)激活肝星狀細胞(HSC)中的作用.方法 大鼠HSC-T6細胞繫培養至對數生長期,分為5組,對照組加DMEM培養液1 ml;HMGB1組加0.1 μg/ml 的HMGB1 1 ml;抗RAGE組將20 μg/ml RAGE抗體加入培養闆2 h後,再加0.1 μg/ml HMGB1;sRAGE組將20 μg/ml sRAGE加入培養闆2 h後,再加0.1 μg/ml HMGB1;AGE組:將160 μg/ml AGE 加入培養闆2 h後,再加0.1 μg/ml HMGB1.刺激 24 h 後,收集各組上清培養液酶聯免疫吸附試驗(ELISA)方法檢測透明質痠(HA)、Ⅲ型膠原(PⅢP)和Ⅳ型膠原(CⅣ)的含量;小心取齣六孔闆內載玻片,免疫組織化學法檢測α-SMA、轉化生長因子(TGF)-β1的錶達.結果 抗RAGE組、sRAGE組與HMGB1組相比,HSC細胞質中的α-SMA和TGF-β1錶達水平和培養液中HA、PⅢP和CⅣ的含量均顯著下降(P<0.05);AGE組與對照組相比,HSC細胞質中的α-SMA和TGF-β1錶達水平和培養液中的HA、PIIIP和CⅣ含量均明顯增高(P<0.05).結論 HMGB1與RAGE結閤,使HSC活化,閤成釋放細胞外基質增加.
목적 탐토만기당기화종말산물수체(RAGE)재고천이솔족단백B1(HMGB1)격활간성상세포(HSC)중적작용.방법 대서HSC-T6세포계배양지대수생장기,분위5조,대조조가DMEM배양액1 ml;HMGB1조가0.1 μg/ml 적HMGB1 1 ml;항RAGE조장20 μg/ml RAGE항체가입배양판2 h후,재가0.1 μg/ml HMGB1;sRAGE조장20 μg/ml sRAGE가입배양판2 h후,재가0.1 μg/ml HMGB1;AGE조:장160 μg/ml AGE 가입배양판2 h후,재가0.1 μg/ml HMGB1.자격 24 h 후,수집각조상청배양액매련면역흡부시험(ELISA)방법검측투명질산(HA)、Ⅲ형효원(PⅢP)화Ⅳ형효원(CⅣ)적함량;소심취출륙공판내재파편,면역조직화학법검측α-SMA、전화생장인자(TGF)-β1적표체.결과 항RAGE조、sRAGE조여HMGB1조상비,HSC세포질중적α-SMA화TGF-β1표체수평화배양액중HA、PⅢP화CⅣ적함량균현저하강(P<0.05);AGE조여대조조상비,HSC세포질중적α-SMA화TGF-β1표체수평화배양액중적HA、PIIIP화CⅣ함량균명현증고(P<0.05).결론 HMGB1여RAGE결합,사HSC활화,합성석방세포외기질증가.