生物技术通讯
生物技術通訊
생물기술통신
LETTERS IN BIOTECHNOLOGY
2002年
2期
112-114，117
,共4页
陶亦敏%张颉%唐亮%陈宇光%谈立松
陶亦敏%張頡%唐亮%陳宇光%談立鬆
도역민%장힐%당량%진우광%담립송
纤溶酶原%Kringle 5%毕赤酵母
纖溶酶原%Kringle 5%畢赤酵母
섬용매원%Kringle 5%필적효모
抽提人肝组织总RNA,通过RT-PCR方法扩增出纤溶酶原Kringle 5片段,将其和分泌表达载体pPIC9K相连,转化毕赤酵母GS115,筛选获得在酵母细胞中遗传稳定表达Kringle 5重组蛋白的工程菌.经甲醇诱导表达5d后,发酵液总蛋白分泌量约120 mg/L,SDS-PAGE呈现相对分子质量约为15×103特异表达带.经Ni-NTA-Agarose纯化后,重组蛋白对人脐静脉内皮细胞有明显的抑制作用,ID50约为4.0μg/ml.
抽提人肝組織總RNA,通過RT-PCR方法擴增齣纖溶酶原Kringle 5片段,將其和分泌錶達載體pPIC9K相連,轉化畢赤酵母GS115,篩選穫得在酵母細胞中遺傳穩定錶達Kringle 5重組蛋白的工程菌.經甲醇誘導錶達5d後,髮酵液總蛋白分泌量約120 mg/L,SDS-PAGE呈現相對分子質量約為15×103特異錶達帶.經Ni-NTA-Agarose純化後,重組蛋白對人臍靜脈內皮細胞有明顯的抑製作用,ID50約為4.0μg/ml.
추제인간조직총RNA,통과RT-PCR방법확증출섬용매원Kringle 5편단,장기화분비표체재체pPIC9K상련,전화필적효모GS115,사선획득재효모세포중유전은정표체Kringle 5중조단백적공정균.경갑순유도표체5d후,발효액총단백분비량약120 mg/L,SDS-PAGE정현상대분자질량약위15×103특이표체대.경Ni-NTA-Agarose순화후,중조단백대인제정맥내피세포유명현적억제작용,ID50약위4.0μg/ml.
