生命科学研究
生命科學研究
생명과학연구
LIFE SCIENCE RESEARCH
2003年
1期
42-47
,共6页
基因克隆%表达克隆法%恶性相关基因%多发性骨髓瘤
基因剋隆%錶達剋隆法%噁性相關基因%多髮性骨髓瘤
기인극륭%표체극륭법%악성상관기인%다발성골수류
为从多发性骨髓瘤细胞中克隆与鉴定恶性相关基因并试图阐明其发病分子机制,建立了一种改进的快速表达克隆法,简单、快捷、直接从多发性骨髓瘤细胞株ARH-77 cDNA文库中克隆恶性相关基因.其特点是常用的表达克隆法与经典的DNA介导的NIH/3T3转染实验相结合,直接从cDNA表达文库中克隆恶性相关基因.首先建立高质量的cDNA表达文库,将cDNA表达文库分成几个基因池,转染NIH/3T3细胞;将转化活性最强的基因池再分成几个亚基因池,转染NIH/3T3细胞;将转化活性最强的亚基因池再分成次级亚基因池,直到获得有明显转化活性的单个cDNA克隆.该技术亦可用于从其他肿瘤细胞中克隆恶性相关基因.
為從多髮性骨髓瘤細胞中剋隆與鑒定噁性相關基因併試圖闡明其髮病分子機製,建立瞭一種改進的快速錶達剋隆法,簡單、快捷、直接從多髮性骨髓瘤細胞株ARH-77 cDNA文庫中剋隆噁性相關基因.其特點是常用的錶達剋隆法與經典的DNA介導的NIH/3T3轉染實驗相結閤,直接從cDNA錶達文庫中剋隆噁性相關基因.首先建立高質量的cDNA錶達文庫,將cDNA錶達文庫分成幾箇基因池,轉染NIH/3T3細胞;將轉化活性最彊的基因池再分成幾箇亞基因池,轉染NIH/3T3細胞;將轉化活性最彊的亞基因池再分成次級亞基因池,直到穫得有明顯轉化活性的單箇cDNA剋隆.該技術亦可用于從其他腫瘤細胞中剋隆噁性相關基因.
위종다발성골수류세포중극륭여감정악성상관기인병시도천명기발병분자궤제,건립료일충개진적쾌속표체극륭법,간단、쾌첩、직접종다발성골수류세포주ARH-77 cDNA문고중극륭악성상관기인.기특점시상용적표체극륭법여경전적DNA개도적NIH/3T3전염실험상결합,직접종cDNA표체문고중극륭악성상관기인.수선건립고질량적cDNA표체문고,장cDNA표체문고분성궤개기인지,전염NIH/3T3세포;장전화활성최강적기인지재분성궤개아기인지,전염NIH/3T3세포;장전화활성최강적아기인지재분성차급아기인지,직도획득유명현전화활성적단개cDNA극륭.해기술역가용우종기타종류세포중극륭악성상관기인.
