中国药理学通报
中國藥理學通報
중국약이학통보
CHINESE PHARMACOLOGICAL BULLETIN
2007年
3期
390-394
,共5页
邵建林%王玲玲%王俊科%朱俊超%叶青山%马宏仲
邵建林%王玲玲%王俊科%硃俊超%葉青山%馬宏仲
소건림%왕령령%왕준과%주준초%협청산%마굉중
desflurane%ERK1/2%P90RSK%HO-1%细胞信号转导%凋亡%神经元%缺血/再灌注
desflurane%ERK1/2%P90RSK%HO-1%細胞信號轉導%凋亡%神經元%缺血/再灌註
desflurane%ERK1/2%P90RSK%HO-1%세포신호전도%조망%신경원%결혈/재관주
目的 探讨脱氟烷(desflurane)的脑保护作用及其与神经元缺血/再灌注损伤后血红素氧合酶-1(HO-1)表达的信号转导通路的关系.方法 将96孔和6孔培养板上培养7 d的海马神经元随机分为7组:正常培养组(C组)、缺血/再灌注组(I/R组)、缺血/ 再灌注+6% desflurane组(D6组)、缺血/再灌注+12% desflurane组(D12组)、缺血/再灌注+12% desflurane+tin-protoporphyrin (HO-1抑制剂)组(T组) 、缺血/ 再灌注+12% desflurane+U-0126(ERK抑制剂)组(U组)、缺血/再灌注+12%desflurane+rapamycin(RS6K抑制剂)组(R组).C组神经元按正常培养方法培养.I/R组神经元进行缺糖缺氧后复糖复氧处理.D6组和D12组在神经元缺糖缺氧的同时接受6%或12% desflurane麻醉.T组、U组和R组在神经元进行缺糖同时分别加入tin-protoporphyrin 、U-0126或Rapamycin使其终浓度均为10 μmol·L-1后同D12组处理.96孔培养板的神经元进行细胞存活力的检测.6孔培养板的神经元进行神经元纯度鉴定、神经元凋亡、HO-1-mRNA表达、磷酸化ERK1/2和P90RSK蛋白表达的检测.结果 缺血/再灌注后神经元存活率降低,凋亡率增加,HO-1-mRNA的表达增加,PERK1/2和PP90RSK蛋白表达增加( vs C组, P＜0.01).D6组PERK1/2和PP90RSK蛋白表达增加,HO-1-mRNA表达增加,神经元存活率增加、神经元凋亡率降低( vs I/R组, P＜0.01).D12组PERK1/2和PP90RSK蛋白表达增加,HO-1-mRNA表达增加,神经元存活率增加、神经元凋亡率降低( vs I/R组或D6组, P＜0.01或 P＜0.05).T组PERK1/2和PP90RSK蛋白表达变化不明显( vs D12组, P＞0.05),HO-1-mRNA表达降低,神经元存活率降低、神经元凋亡率增加( vs D12组, P＜0.01).U组PERK1/2和PP90RSK表达降低,HO-1-mRNA表达降低,神经元存活率降低、神经元凋亡率增加( vs D12组, P＜0.05或 P＜0.01).R组PERK1/2蛋白表达变化不明显( vs D12组, P＞0.05),PP90RSK表达降低,HO-1-mRNA表达降低,神经元存活率降低,神经元凋亡率增加( vs D12组, P＜0.05或 P＜0.01).结论 Desflurane通过ERK1/2/P90RSK信号转导通路激活HO-1,在海马神经元缺血/再灌注时抑制了神经元凋亡,保护了神经元.
目的 探討脫氟烷(desflurane)的腦保護作用及其與神經元缺血/再灌註損傷後血紅素氧閤酶-1(HO-1)錶達的信號轉導通路的關繫.方法 將96孔和6孔培養闆上培養7 d的海馬神經元隨機分為7組:正常培養組(C組)、缺血/再灌註組(I/R組)、缺血/ 再灌註+6% desflurane組(D6組)、缺血/再灌註+12% desflurane組(D12組)、缺血/再灌註+12% desflurane+tin-protoporphyrin (HO-1抑製劑)組(T組) 、缺血/ 再灌註+12% desflurane+U-0126(ERK抑製劑)組(U組)、缺血/再灌註+12%desflurane+rapamycin(RS6K抑製劑)組(R組).C組神經元按正常培養方法培養.I/R組神經元進行缺糖缺氧後複糖複氧處理.D6組和D12組在神經元缺糖缺氧的同時接受6%或12% desflurane痳醉.T組、U組和R組在神經元進行缺糖同時分彆加入tin-protoporphyrin 、U-0126或Rapamycin使其終濃度均為10 μmol·L-1後同D12組處理.96孔培養闆的神經元進行細胞存活力的檢測.6孔培養闆的神經元進行神經元純度鑒定、神經元凋亡、HO-1-mRNA錶達、燐痠化ERK1/2和P90RSK蛋白錶達的檢測.結果 缺血/再灌註後神經元存活率降低,凋亡率增加,HO-1-mRNA的錶達增加,PERK1/2和PP90RSK蛋白錶達增加( vs C組, P＜0.01).D6組PERK1/2和PP90RSK蛋白錶達增加,HO-1-mRNA錶達增加,神經元存活率增加、神經元凋亡率降低( vs I/R組, P＜0.01).D12組PERK1/2和PP90RSK蛋白錶達增加,HO-1-mRNA錶達增加,神經元存活率增加、神經元凋亡率降低( vs I/R組或D6組, P＜0.01或 P＜0.05).T組PERK1/2和PP90RSK蛋白錶達變化不明顯( vs D12組, P＞0.05),HO-1-mRNA錶達降低,神經元存活率降低、神經元凋亡率增加( vs D12組, P＜0.01).U組PERK1/2和PP90RSK錶達降低,HO-1-mRNA錶達降低,神經元存活率降低、神經元凋亡率增加( vs D12組, P＜0.05或 P＜0.01).R組PERK1/2蛋白錶達變化不明顯( vs D12組, P＞0.05),PP90RSK錶達降低,HO-1-mRNA錶達降低,神經元存活率降低,神經元凋亡率增加( vs D12組, P＜0.05或 P＜0.01).結論 Desflurane通過ERK1/2/P90RSK信號轉導通路激活HO-1,在海馬神經元缺血/再灌註時抑製瞭神經元凋亡,保護瞭神經元.
목적 탐토탈불완(desflurane)적뇌보호작용급기여신경원결혈/재관주손상후혈홍소양합매-1(HO-1)표체적신호전도통로적관계.방법 장96공화6공배양판상배양7 d적해마신경원수궤분위7조:정상배양조(C조)、결혈/재관주조(I/R조)、결혈/ 재관주+6% desflurane조(D6조)、결혈/재관주+12% desflurane조(D12조)、결혈/재관주+12% desflurane+tin-protoporphyrin (HO-1억제제)조(T조) 、결혈/ 재관주+12% desflurane+U-0126(ERK억제제)조(U조)、결혈/재관주+12%desflurane+rapamycin(RS6K억제제)조(R조).C조신경원안정상배양방법배양.I/R조신경원진행결당결양후복당복양처리.D6조화D12조재신경원결당결양적동시접수6%혹12% desflurane마취.T조、U조화R조재신경원진행결당동시분별가입tin-protoporphyrin 、U-0126혹Rapamycin사기종농도균위10 μmol·L-1후동D12조처리.96공배양판적신경원진행세포존활력적검측.6공배양판적신경원진행신경원순도감정、신경원조망、HO-1-mRNA표체、린산화ERK1/2화P90RSK단백표체적검측.결과 결혈/재관주후신경원존활솔강저,조망솔증가,HO-1-mRNA적표체증가,PERK1/2화PP90RSK단백표체증가( vs C조, P＜0.01).D6조PERK1/2화PP90RSK단백표체증가,HO-1-mRNA표체증가,신경원존활솔증가、신경원조망솔강저( vs I/R조, P＜0.01).D12조PERK1/2화PP90RSK단백표체증가,HO-1-mRNA표체증가,신경원존활솔증가、신경원조망솔강저( vs I/R조혹D6조, P＜0.01혹 P＜0.05).T조PERK1/2화PP90RSK단백표체변화불명현( vs D12조, P＞0.05),HO-1-mRNA표체강저,신경원존활솔강저、신경원조망솔증가( vs D12조, P＜0.01).U조PERK1/2화PP90RSK표체강저,HO-1-mRNA표체강저,신경원존활솔강저、신경원조망솔증가( vs D12조, P＜0.05혹 P＜0.01).R조PERK1/2단백표체변화불명현( vs D12조, P＞0.05),PP90RSK표체강저,HO-1-mRNA표체강저,신경원존활솔강저,신경원조망솔증가( vs D12조, P＜0.05혹 P＜0.01).결론 Desflurane통과ERK1/2/P90RSK신호전도통로격활HO-1,재해마신경원결혈/재관주시억제료신경원조망,보호료신경원.
