农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2007年
6期
1042-1047
,共6页
陈芬%熊伟%闵勇%范与庆%梁运祥%吕和平%邢仁昌%郑应华
陳芬%熊偉%閔勇%範與慶%樑運祥%呂和平%邢仁昌%鄭應華
진분%웅위%민용%범여경%량운상%려화평%형인창%정응화
肉桂地链霉菌%接合转移%nsdA基因%基因中断
肉桂地鏈黴菌%接閤轉移%nsdA基因%基因中斷
육계지련매균%접합전이%nsdA기인%기인중단
以pSETl52和pHL212为出发质粒,通过供体大肠杆菌(Escherichia coli)ET12567(pUZ8002)和S17-1属间接合转移肉桂地链霉菌(Streptomyces cinnamonensis),构建并优化了肉桂地链霉菌的接合转移系统.利用PCR介导的基因置换技术快速构建了肉桂地链霉菌nsdA(negative regulator of Streptomyces differentiation)基因中断载体,通过接合转移导入肉桂地链霉菌工业菌株BIB2005,筛选得到1株遗传稳定表型为AprRKanS的接合子BIB309.PCR分析结果显示,该接合子即为nsdA中断突变株.与出发工业菌株相比,在摇瓶水平上nsdA中断突变株BIB309莫能菌素产能提高了2.7倍.
以pSETl52和pHL212為齣髮質粒,通過供體大腸桿菌(Escherichia coli)ET12567(pUZ8002)和S17-1屬間接閤轉移肉桂地鏈黴菌(Streptomyces cinnamonensis),構建併優化瞭肉桂地鏈黴菌的接閤轉移繫統.利用PCR介導的基因置換技術快速構建瞭肉桂地鏈黴菌nsdA(negative regulator of Streptomyces differentiation)基因中斷載體,通過接閤轉移導入肉桂地鏈黴菌工業菌株BIB2005,篩選得到1株遺傳穩定錶型為AprRKanS的接閤子BIB309.PCR分析結果顯示,該接閤子即為nsdA中斷突變株.與齣髮工業菌株相比,在搖瓶水平上nsdA中斷突變株BIB309莫能菌素產能提高瞭2.7倍.
이pSETl52화pHL212위출발질립,통과공체대장간균(Escherichia coli)ET12567(pUZ8002)화S17-1속간접합전이육계지련매균(Streptomyces cinnamonensis),구건병우화료육계지련매균적접합전이계통.이용PCR개도적기인치환기술쾌속구건료육계지련매균nsdA(negative regulator of Streptomyces differentiation)기인중단재체,통과접합전이도입육계지련매균공업균주BIB2005,사선득도1주유전은정표형위AprRKanS적접합자BIB309.PCR분석결과현시,해접합자즉위nsdA중단돌변주.여출발공업균주상비,재요병수평상nsdA중단돌변주BIB309막능균소산능제고료2.7배.
