广州管圆线虫ASP基因的克隆及原核表达
엄주관원선충ASP기인적극륭급원핵표체
Cloning and prokaryotic expression of ASP gene from Angiostrongylus cantonensis
  • 万方数据
    中国人兽共患病学报 중국인수공환병학보
    CHINESE JOURNAL OF ZOONOSES
    2010年 5期 471-474 ,共4页

    郭鹏娟%詹希美%甘明%李卓雅%于彦杰%潘智华%张美春%何蔼

    곽붕연%첨희미%감명%리탁아%우언걸%반지화%장미춘%하애

    广州管圆线虫%天冬氨酸蛋白酶%基因克隆%原核表达%免疫性 廣州管圓線蟲%天鼕氨痠蛋白酶%基因剋隆%原覈錶達%免疫性
    엄주관원선충%천동안산단백매%기인극륭%원핵표체%면역성
    目的 对广州管圆线虫ASP基因的完整开放读码框进行克隆、表达及重组蛋白的免疫性分析.方法 以广州管圆线虫幼虫cDNA文库中含有ASP基因的质粒为模板,扩增目的 基因,进一步将其克隆到原核表达质粒pET-30a(+)中, 重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达, Ni-IDA亲和层析纯化表达产物.免疫印迹(Western blotting)分析重组蛋白的免疫性.结果 广州管圆线虫ASP基因的编码区含有366个碱基,编码121个氨基酸,相对分子量(Mt)为13 398.26Da.重组质粒pET-30a(+)-ASP构建成功,IPTG诱导获得可溶性表达的重组蛋白,经亲和层析获得的纯化蛋白可被广州管圆线虫病人血清识别. 结论广州管圆线虫ASP基因可在原核表达系统中获得具有免疫性的高效表达.
    목적 대엄주관원선충ASP기인적완정개방독마광진행극륭、표체급중조단백적면역성분석.방법 이엄주관원선충유충cDNA문고중함유ASP기인적질립위모판,확증목적 기인,진일보장기극륭도원핵표체질립pET-30a(+)중, 중조질립전화대장간균BL21(DE3),경이병기류대-β-D-반유당감(IPTG)유도표체, Ni-IDA친화층석순화표체산물.면역인적(Western blotting)분석중조단백적면역성.결과 엄주관원선충ASP기인적편마구함유366개감기,편마121개안기산,상대분자량(Mt)위13 398.26Da.중조질립pET-30a(+)-ASP구건성공,IPTG유도획득가용성표체적중조단백,경친화층석획득적순화단백가피엄주관원선충병인혈청식별. 결론엄주관원선충ASP기인가재원핵표체계통중획득구유면역성적고효표체.
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