河南农业科学
河南農業科學
하남농업과학
JOURNAL OF HENAN AGRICULTURAL SCIENCES
2011年
10期
141-143,152
,共4页
piggyBac%反向PCR%稳定表达%转基因%哺乳动物
piggyBac%反嚮PCR%穩定錶達%轉基因%哺乳動物
piggyBac%반향PCR%은정표체%전기인%포유동물
利用反向PCR技术,研究piggyBac介导的转基因哺乳动物中外源基因整合位点信息.首先在转座子piggyBac中插入巨细胞病毒(CMV)启动子元件驱动的绿色荧光蛋白基因(EGFP),构建用于转染哺乳动物细胞的转基因载体pXL - CMV - EGFP；同时构建以CMV启动子驱动的转座酶基因载体.将2种载体以脂质体共转染HEK293细胞,以单独的pXL-CMV-EGFP转染为阴性对照,结果表明,2个处理均观察到了绿色荧光蛋白的表达.通过反向PCR鉴定,在共转染转座酶的细胞基因组DNA中检测到外源基因的整合,而阴性对照中没有检测到,研究结果为进一步分析整合位点的信息及转基因检测提供了依据.
利用反嚮PCR技術,研究piggyBac介導的轉基因哺乳動物中外源基因整閤位點信息.首先在轉座子piggyBac中插入巨細胞病毒(CMV)啟動子元件驅動的綠色熒光蛋白基因(EGFP),構建用于轉染哺乳動物細胞的轉基因載體pXL - CMV - EGFP；同時構建以CMV啟動子驅動的轉座酶基因載體.將2種載體以脂質體共轉染HEK293細胞,以單獨的pXL-CMV-EGFP轉染為陰性對照,結果錶明,2箇處理均觀察到瞭綠色熒光蛋白的錶達.通過反嚮PCR鑒定,在共轉染轉座酶的細胞基因組DNA中檢測到外源基因的整閤,而陰性對照中沒有檢測到,研究結果為進一步分析整閤位點的信息及轉基因檢測提供瞭依據.
이용반향PCR기술,연구piggyBac개도적전기인포유동물중외원기인정합위점신식.수선재전좌자piggyBac중삽입거세포병독(CMV)계동자원건구동적록색형광단백기인(EGFP),구건용우전염포유동물세포적전기인재체pXL - CMV - EGFP；동시구건이CMV계동자구동적전좌매기인재체.장2충재체이지질체공전염HEK293세포,이단독적pXL-CMV-EGFP전염위음성대조,결과표명,2개처리균관찰도료록색형광단백적표체.통과반향PCR감정,재공전염전좌매적세포기인조DNA중검측도외원기인적정합,이음성대조중몰유검측도,연구결과위진일보분석정합위점적신식급전기인검측제공료의거.
