畜牧兽医学报
畜牧獸醫學報
축목수의학보
2012年
2期
275-281
,共7页
库旭钢%张坤%刘羽茜%何启盖
庫旭鋼%張坤%劉羽茜%何啟蓋
고욱강%장곤%류우천%하계개
猪A群轮状病毒%分离%鉴定
豬A群輪狀病毒%分離%鑒定
저A군륜상병독%분리%감정
目前国内对猪轮状病毒的研究较少,作者旨在对猪A群轮状病毒进行分离与鉴定,为后续猪轮状病毒致病机理和分子生物学特性研究奠定基础.用胰蛋白酶处理RT-PCR检测猪A群轮状病毒病原阳性的临床腹泻粪样,然后接种长成单层的MA-104细胞,进行病毒分离传代.再对分离毒株进行常规RT-PCR鉴定和电镜观察,并对分离毒株的VP6、VP7和VP8基因进行测序及序列分析.结果成功分离猪A群轮状病毒TM-a株,经序列同源性分析发现,与TM-a株VP6、VP7和VP8基因同源性最高的毒株分别为中国北京人源LL3354株、印度人源RMC321株和日本野猪源GUB-71株,其相似性为96.0%、95.1%和97.0%.该TM-a株轮状病毒不同基因表现出与人源轮状病毒和猪源轮状病毒的高度同源性,推测猪A群轮状病毒可能在人畜间传播,发生基因重组现象.
目前國內對豬輪狀病毒的研究較少,作者旨在對豬A群輪狀病毒進行分離與鑒定,為後續豬輪狀病毒緻病機理和分子生物學特性研究奠定基礎.用胰蛋白酶處理RT-PCR檢測豬A群輪狀病毒病原暘性的臨床腹瀉糞樣,然後接種長成單層的MA-104細胞,進行病毒分離傳代.再對分離毒株進行常規RT-PCR鑒定和電鏡觀察,併對分離毒株的VP6、VP7和VP8基因進行測序及序列分析.結果成功分離豬A群輪狀病毒TM-a株,經序列同源性分析髮現,與TM-a株VP6、VP7和VP8基因同源性最高的毒株分彆為中國北京人源LL3354株、印度人源RMC321株和日本野豬源GUB-71株,其相似性為96.0%、95.1%和97.0%.該TM-a株輪狀病毒不同基因錶現齣與人源輪狀病毒和豬源輪狀病毒的高度同源性,推測豬A群輪狀病毒可能在人畜間傳播,髮生基因重組現象.
목전국내대저륜상병독적연구교소,작자지재대저A군륜상병독진행분리여감정,위후속저륜상병독치병궤리화분자생물학특성연구전정기출.용이단백매처리RT-PCR검측저A군륜상병독병원양성적림상복사분양,연후접충장성단층적MA-104세포,진행병독분리전대.재대분리독주진행상규RT-PCR감정화전경관찰,병대분리독주적VP6、VP7화VP8기인진행측서급서렬분석.결과성공분리저A군륜상병독TM-a주,경서렬동원성분석발현,여TM-a주VP6、VP7화VP8기인동원성최고적독주분별위중국북경인원LL3354주、인도인원RMC321주화일본야저원GUB-71주,기상사성위96.0%、95.1%화97.0%.해TM-a주륜상병독불동기인표현출여인원륜상병독화저원륜상병독적고도동원성,추측저A군륜상병독가능재인축간전파,발생기인중조현상.