CAJ | 학술논문

为了解Na+-K+-ATPase a1基因的分子结构及其在建鲤盐度调控过程中起到的作用,采用同源克隆和末端快速扩增(RACE)的方法分离克隆了建鲤(Cyprinus carpio var.jian)Na+-K+-ATPase α1基因全长cDNA,得到3 397 bp的全长cDNA,包括3 081 bp的开放阅读框(ORF),232 bp的5’末端非编码区(UTR)以及219 bp的3’末端非编码区(UTR).对推测的该基因氨基酸序列进行同源性比对和系统分析显示:建鲤与其他鱼类该基因的氨基酸序列相似度为90.22％～95.52％,与斑马鱼(Danio rerio)相似度最高(95.52％),与虱日鱼(Chanos chanos)相似度偏低,其次是平鲷(Rhabdosargus sarba)、萨罗罗非鱼(Sarotherodon melanotheron)、底鳉(Fundulus heteroclitus)、黑鲷(Acanthopagrusschlegelii)、马苏大马哈鱼(Oncorhynchus masou)和虹鳟(Oncorhynchus mykiss),与大两洋鲑(Salmo salar)的相似度最低(90.22％),与非洲爪蟾(Xenopus laevis)和人(Homo sapiens)的相似度分别为89.62％和89.51％.以上结果表明,不同物种间的Na+-K+-ATPase α1基因的氧基酸序列极为保守.用实时定量PCR (RT-PCR)检测该基因在建鲤鳃,肾、肠、肝、脑和脾的相对表达量,其中脑最高,其次是鳃、脾、肾、肠,肝最低,这表明脑、鳃和脾是建鲤Na+-K+-ATPaseα1基因主要的表达器官.本研究旨为进一步探索建鲤的盐度调控机制奠定分子基础.
위료해Na+-K+-ATPase a1기인적분자결구급기재건리염도조공과정중기도적작용,채용동원극륭화말단쾌속확증(RACE)적방법분리극륭료건리(Cyprinus carpio var.jian)Na+-K+-ATPase α1기인전장cDNA,득도3 397 bp적전장cDNA,포괄3 081 bp적개방열독광(ORF),232 bp적5’말단비편마구(UTR)이급219 bp적3’말단비편마구(UTR).대추측적해기인안기산서렬진행동원성비대화계통분석현시:건리여기타어류해기인적안기산서렬상사도위90.22％～95.52％,여반마어(Danio rerio)상사도최고(95.52％),여슬일어(Chanos chanos)상사도편저,기차시평조(Rhabdosargus sarba)、살라라비어(Sarotherodon melanotheron)、저장(Fundulus heteroclitus)、흑조(Acanthopagrusschlegelii)、마소대마합어(Oncorhynchus masou)화홍준(Oncorhynchus mykiss),여대량양해(Salmo salar)적상사도최저(90.22％),여비주조섬(Xenopus laevis)화인(Homo sapiens)적상사도분별위89.62％화89.51％.이상결과표명,불동물충간적Na+-K+-ATPase α1기인적양기산서렬겁위보수.용실시정량PCR (RT-PCR)검측해기인재건리새,신、장、간、뇌화비적상대표체량,기중뇌최고,기차시새、비、신、장,간최저,저표명뇌、새화비시건리Na+-K+-ATPaseα1기인주요적표체기관.본연구지위진일보탐색건리적염도조공궤제전정분자기출.