中华结核和呼吸杂志
中華結覈和呼吸雜誌
중화결핵화호흡잡지
Chinese Journal of Tuberculosis and Respiratory Diseases
2007年
3期
207-210
,共4页
假单胞菌,铜绿%纤毛,细菌%红霉素
假單胞菌,銅綠%纖毛,細菌%紅黴素
가단포균,동록%섬모,세균%홍매소
目的 体外培养铜绿假单胞菌(pseudomonas aeruginosa,PA),观察低浓度红霉素对铜绿假单胞菌蹭行运动(twitching motility)的影响.方法 将铜绿假单胞菌ATCC1244菌株接种于3组不同浓度红霉素(2.5 mg/L、0.5 mg/L、0.25 mg/L)的细菌培养基中,同时接种于未加红霉素的对照培养基中,采用肉眼观察、免疫荧光显微镜检查、免疫印迹实验、点杂交实验、电镜观察等方法观察铜绿假单胞菌蹭行运动的变化及鉴别其蹭行运动的分子组成.结果 经过18～36 h的孵育,LB平板上不同浓度的红霉素对PA蹭行运动有抑制作用,细菌光晕(halarion)直径与药物浓度呈反比;18 h时细菌的平均光晕直径2.5 mg/L组为(0.48±0.14)cm,0.5 mg/L组为(0.64±0.20)cm,0.25 mg/L组为(0.95±0.18)cm,对照组为(1.40±0.21)cm,组间比较差异有统计学意义(F=123.15,P＜0.01);24 h时2.5 mg/L组为(0.67±0.12)cm,0.5 mg/L组为(0.82±0.23)cm,0.25 mg/L组为(1.18±0.24)cm,对照组为(1.58±0.28)cm,组间比较差异有统计学意义(F=76.37,P＜0.01);36 h时2.5 mg/L组为(0.91±0.17)cm,0.5 mg/L组为(1.04±0.32)cm,0.25 mg/L组为(1.49±0.31)cm,对照组为(2.07±0.38)cm,组间比较差异有统计学意义(F=54.75,P＜0.01).免疫荧光显微镜观察结果可见细菌菌体一端呈簇状突起,为Ⅳ型菌毛的位置所在,簇状突起的多少与药物浓度呈反比.免疫印迹实验结果显示,随着药物浓度的减少,Ⅳ型菌毛的主要成分PilA蛋白表达增加.点杂交实验结果显示在蹭行运动中起作用的PilA蛋白主要表达在光晕的最外周,但组间未见明显区别.电镜下可见红霉素作用后PA菌体一端的Ⅳ型菌毛较对照组减少,部分脱离菌体.结论 低浓度红霉素对PA的蹭行运动有抑制作用,且与红霉素浓度呈正比.
目的 體外培養銅綠假單胞菌(pseudomonas aeruginosa,PA),觀察低濃度紅黴素對銅綠假單胞菌蹭行運動(twitching motility)的影響.方法 將銅綠假單胞菌ATCC1244菌株接種于3組不同濃度紅黴素(2.5 mg/L、0.5 mg/L、0.25 mg/L)的細菌培養基中,同時接種于未加紅黴素的對照培養基中,採用肉眼觀察、免疫熒光顯微鏡檢查、免疫印跡實驗、點雜交實驗、電鏡觀察等方法觀察銅綠假單胞菌蹭行運動的變化及鑒彆其蹭行運動的分子組成.結果 經過18～36 h的孵育,LB平闆上不同濃度的紅黴素對PA蹭行運動有抑製作用,細菌光暈(halarion)直徑與藥物濃度呈反比;18 h時細菌的平均光暈直徑2.5 mg/L組為(0.48±0.14)cm,0.5 mg/L組為(0.64±0.20)cm,0.25 mg/L組為(0.95±0.18)cm,對照組為(1.40±0.21)cm,組間比較差異有統計學意義(F=123.15,P＜0.01);24 h時2.5 mg/L組為(0.67±0.12)cm,0.5 mg/L組為(0.82±0.23)cm,0.25 mg/L組為(1.18±0.24)cm,對照組為(1.58±0.28)cm,組間比較差異有統計學意義(F=76.37,P＜0.01);36 h時2.5 mg/L組為(0.91±0.17)cm,0.5 mg/L組為(1.04±0.32)cm,0.25 mg/L組為(1.49±0.31)cm,對照組為(2.07±0.38)cm,組間比較差異有統計學意義(F=54.75,P＜0.01).免疫熒光顯微鏡觀察結果可見細菌菌體一耑呈簇狀突起,為Ⅳ型菌毛的位置所在,簇狀突起的多少與藥物濃度呈反比.免疫印跡實驗結果顯示,隨著藥物濃度的減少,Ⅳ型菌毛的主要成分PilA蛋白錶達增加.點雜交實驗結果顯示在蹭行運動中起作用的PilA蛋白主要錶達在光暈的最外週,但組間未見明顯區彆.電鏡下可見紅黴素作用後PA菌體一耑的Ⅳ型菌毛較對照組減少,部分脫離菌體.結論 低濃度紅黴素對PA的蹭行運動有抑製作用,且與紅黴素濃度呈正比.
목적 체외배양동록가단포균(pseudomonas aeruginosa,PA),관찰저농도홍매소대동록가단포균층행운동(twitching motility)적영향.방법 장동록가단포균ATCC1244균주접충우3조불동농도홍매소(2.5 mg/L、0.5 mg/L、0.25 mg/L)적세균배양기중,동시접충우미가홍매소적대조배양기중,채용육안관찰、면역형광현미경검사、면역인적실험、점잡교실험、전경관찰등방법관찰동록가단포균층행운동적변화급감별기층행운동적분자조성.결과 경과18～36 h적부육,LB평판상불동농도적홍매소대PA층행운동유억제작용,세균광훈(halarion)직경여약물농도정반비;18 h시세균적평균광훈직경2.5 mg/L조위(0.48±0.14)cm,0.5 mg/L조위(0.64±0.20)cm,0.25 mg/L조위(0.95±0.18)cm,대조조위(1.40±0.21)cm,조간비교차이유통계학의의(F=123.15,P＜0.01);24 h시2.5 mg/L조위(0.67±0.12)cm,0.5 mg/L조위(0.82±0.23)cm,0.25 mg/L조위(1.18±0.24)cm,대조조위(1.58±0.28)cm,조간비교차이유통계학의의(F=76.37,P＜0.01);36 h시2.5 mg/L조위(0.91±0.17)cm,0.5 mg/L조위(1.04±0.32)cm,0.25 mg/L조위(1.49±0.31)cm,대조조위(2.07±0.38)cm,조간비교차이유통계학의의(F=54.75,P＜0.01).면역형광현미경관찰결과가견세균균체일단정족상돌기,위Ⅳ형균모적위치소재,족상돌기적다소여약물농도정반비.면역인적실험결과현시,수착약물농도적감소,Ⅳ형균모적주요성분PilA단백표체증가.점잡교실험결과현시재층행운동중기작용적PilA단백주요표체재광훈적최외주,단조간미견명현구별.전경하가견홍매소작용후PA균체일단적Ⅳ형균모교대조조감소,부분탈리균체.결론 저농도홍매소대PA적층행운동유억제작용,차여홍매소농도정정비.
