加载HPV6E7抗原肽的HLA-A2单体及其四聚体的制备和鉴定
가재HPV6E7항원태적HLA-A2단체급기사취체적제비화감정
Preparation and Identification of The Soluble HLA-A2 Monomer and Tetramer Loaded with HPV6E7 Antigenic Peptide
  • 万方数据
    中国皮肤性病学杂志 중국피부성병학잡지
    THE CHINESE JOURNAL OF DERMATOVENEREOLOGY
    2006年 9期 519-522 ,共4页

    张彩娥%邓云华%吴雄文%梁智辉%翁秀芳%卢小玲%夏芳珍%钟茂华%陆盛军

    장채아%산운화%오웅문%량지휘%옹수방%로소령%하방진%종무화%륙성군

    HLA-A2%sHLA-A2/HPV6E7四聚体%尖锐湿疣%细胞毒性T细胞 HLA-A2%sHLA-A2/HPV6E7四聚體%尖銳濕疣%細胞毒性T細胞
    HLA-A2%sHLA-A2/HPV6E7사취체%첨예습우%세포독성T세포
    目的 制备可生物素化的可溶性HLA-A2/HPV6E7单体,进一步组装成PE标记的可溶性HLA-A2/HPV6E7四聚体.方法 以原核表达的sHLA-A2BSP为重链,β2m为轻链,与人工合成的HPV6E7(22-30)抗原肽(GLH-CYEQLV)利用稀释法进行共折叠复性得到单体.利用HLAI类分子单抗(W6/3)和抗Bzm抗体进行Western blot和ELISA鉴定折叠产物的构象.以BirA酶对其进行生物素化,经过超滤离心后得到纯化的sHLA-A2/HPV6E7单体,再与Streptavidin-PE按4:1比例混合形成四聚体.结果 该四聚体具有与HLA-A2阳性HPV6感染的CA患者的抗原特异性CTL结合活性.结论 成功获得了天然构象的sHLA-A2/HPV6E7单体及PE标记的HLA-A2/HPV6E7四聚体.
    목적 제비가생물소화적가용성HLA-A2/HPV6E7단체,진일보조장성PE표기적가용성HLA-A2/HPV6E7사취체.방법 이원핵표체적sHLA-A2BSP위중련,β2m위경련,여인공합성적HPV6E7(22-30)항원태(GLH-CYEQLV)이용희석법진행공절첩복성득도단체.이용HLAI류분자단항(W6/3)화항Bzm항체진행Western blot화ELISA감정절첩산물적구상.이BirA매대기진행생물소화,경과초려리심후득도순화적sHLA-A2/HPV6E7단체,재여Streptavidin-PE안4:1비례혼합형성사취체.결과 해사취체구유여HLA-A2양성HPV6감염적CA환자적항원특이성CTL결합활성.결론 성공획득료천연구상적sHLA-A2/HPV6E7단체급PE표기적HLA-A2/HPV6E7사취체.
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