CAJ | 학술논문

目的:探讨胎肝AFT024细胞对人类脐血造血干细胞体外扩增的作用及对多药耐药基因(MDR1)转染效率的影响.方法: 应用AFT024细胞支持下体外长期培养的方法将人类MDR1基因转入脐血CD34+ 细胞,观察细胞扩增倍数来检测AFT024细胞对造血干/祖细胞的扩增能力,采用RT-PCR、流式细胞术及耐药集落检测的方法测定基因转染效率、P-糖蛋白(P-gp)的表达及其功能活性.结果: (1)培养21 d后AFT024细胞对有核细胞总数(TNC)的扩增没有明显作用,但CD34+ 细胞和集落形成细胞(CFC)的扩增倍数[(37.9±13.9)倍和(27.1±13.3)倍]均明显高于对照组[(9.1±2.3)倍和(7.7±3.6)倍],差异均有统计学意义(P＜0.01).(2)RT-PCR法可在AFT024组的转染细胞中检测到较高的MDR1 mRNA水平,AFT024组基因转染效率(46.0%)明显高于对照组(15.2%);两组P-gp的表达分别为(31.7±10.2)% 和(12.6±3.9)%;Rhodamine-123排出试验显示,具有P-gp功能活性的细胞分别为(35.5±11.4)%和(16.6±3.2)%,组间比较差异均有统计学意义(P＜0.01).结论: AFT024细胞具有较强的扩增造血干/祖细胞的能力,并能明显提高MDR1基因在脐血CD34+ 细胞中的转染效率.
목적:탐토태간AFT024세포대인류제혈조혈간세포체외확증적작용급대다약내약기인(MDR1)전염효솔적영향.방법: 응용AFT024세포지지하체외장기배양적방법장인류MDR1기인전입제혈CD34+ 세포,관찰세포확증배수래검측AFT024세포대조혈간/조세포적확증능력,채용RT-PCR、류식세포술급내약집락검측적방법측정기인전염효솔、P-당단백(P-gp)적표체급기공능활성.결과: (1)배양21 d후AFT024세포대유핵세포총수(TNC)적확증몰유명현작용,단CD34+ 세포화집락형성세포(CFC)적확증배수[(37.9±13.9)배화(27.1±13.3)배]균명현고우대조조[(9.1±2.3)배화(7.7±3.6)배],차이균유통계학의의(P＜0.01).(2)RT-PCR법가재AFT024조적전염세포중검측도교고적MDR1 mRNA수평,AFT024조기인전염효솔(46.0%)명현고우대조조(15.2%);량조P-gp적표체분별위(31.7±10.2)% 화(12.6±3.9)%;Rhodamine-123배출시험현시,구유P-gp공능활성적세포분별위(35.5±11.4)%화(16.6±3.2)%,조간비교차이균유통계학의의(P＜0.01).결론: AFT024세포구유교강적확증조혈간/조세포적능력,병능명현제고MDR1기인재제혈CD34+ 세포중적전염효솔.