中国生物工程杂志
中國生物工程雜誌
중국생물공정잡지
JOURNAL OF CHINESE BIOTECHNOLOGY
2007年
4期
77-82
,共6页
张领兵%伦艳妮%于乐洋%闫东梅%马威%杜柏榕%朱迅
張領兵%倫豔妮%于樂洋%閆東梅%馬威%杜柏榕%硃迅
장령병%륜염니%우악양%염동매%마위%두백용%주신
巨噬细胞%膜蛋白%蛋白质组学%SDS-聚丙烯酰氨凝胶电泳%串联质谱
巨噬細胞%膜蛋白%蛋白質組學%SDS-聚丙烯酰氨凝膠電泳%串聯質譜
거서세포%막단백%단백질조학%SDS-취병희선안응효전영%천련질보
用膜蛋白分离试剂盒提取巨噬细胞膜蛋白,然后用SDS-聚丙烯酰氨凝胶电泳进行分离.将每个泳道平均切成8份,合并两个泳道同样位置的胶条,分别进行胶内酶解.酶解得到的多肽经脱盐后进入毛细管反相柱进行反相分离,分离后的肽段直接进入电喷离子源质谱仪进行一级和二级质谱分析.质谱数据用SEQUEST软件对小鼠IPI蛋白数据库进行检索,得到一个含有1000多种蛋白的名单,其中包括458种经GOA注释的膜蛋白.对膜蛋白部分进一步分析发现,其中包括CD11b、TNF-a、F4/80、CD14、CD18、CD86、CD44、CD16、Toll样受体等已知表达在巨噬细胞表面的蛋白分子,还包括另外13种CD分子和18种Ras相关GTPase,除了这些已知蛋白之外,还鉴定出若干新蛋白分子,为进一步深入研究巨噬细胞生物学功能提供了目标分子.
用膜蛋白分離試劑盒提取巨噬細胞膜蛋白,然後用SDS-聚丙烯酰氨凝膠電泳進行分離.將每箇泳道平均切成8份,閤併兩箇泳道同樣位置的膠條,分彆進行膠內酶解.酶解得到的多肽經脫鹽後進入毛細管反相柱進行反相分離,分離後的肽段直接進入電噴離子源質譜儀進行一級和二級質譜分析.質譜數據用SEQUEST軟件對小鼠IPI蛋白數據庫進行檢索,得到一箇含有1000多種蛋白的名單,其中包括458種經GOA註釋的膜蛋白.對膜蛋白部分進一步分析髮現,其中包括CD11b、TNF-a、F4/80、CD14、CD18、CD86、CD44、CD16、Toll樣受體等已知錶達在巨噬細胞錶麵的蛋白分子,還包括另外13種CD分子和18種Ras相關GTPase,除瞭這些已知蛋白之外,還鑒定齣若榦新蛋白分子,為進一步深入研究巨噬細胞生物學功能提供瞭目標分子.
용막단백분리시제합제취거서세포막단백,연후용SDS-취병희선안응효전영진행분리.장매개영도평균절성8빈,합병량개영도동양위치적효조,분별진행효내매해.매해득도적다태경탈염후진입모세관반상주진행반상분리,분리후적태단직접진입전분리자원질보의진행일급화이급질보분석.질보수거용SEQUEST연건대소서IPI단백수거고진행검색,득도일개함유1000다충단백적명단,기중포괄458충경GOA주석적막단백.대막단백부분진일보분석발현,기중포괄CD11b、TNF-a、F4/80、CD14、CD18、CD86、CD44、CD16、Toll양수체등이지표체재거서세포표면적단백분자,환포괄령외13충CD분자화18충Ras상관GTPase,제료저사이지단백지외,환감정출약간신단백분자,위진일보심입연구거서세포생물학공능제공료목표분자.
