细胞与分子免疫学杂志
細胞與分子免疫學雜誌
세포여분자면역학잡지
2007年
8期
691-695
,共5页
程联胜%查昭%席甲甲%江冰%刘兢%姚雪彪
程聯勝%查昭%席甲甲%江冰%劉兢%姚雪彪
정련성%사소%석갑갑%강빙%류긍%요설표
HER2%RNA干涉%小干涉RNA%腺病毒%基因治疗
HER2%RNA榦涉%小榦涉RNA%腺病毒%基因治療
HER2%RNA간섭%소간섭RNA%선병독%기인치료
目的:探讨采用腺病毒做为载体介导基于RNA干涉的针对高HER2肿瘤的基因治疗的可能性.方法:构建HER2-绿色荧光蛋白融合蛋白表达质粒pHER2-GFP,并与9种针对HER2不同靶序列的siRNA表达质粒分别共转染CHO-K1细胞, 根据荧光蛋白表达量从中筛选出沉默效率最高的质粒.将筛选出的质粒转染HER2高表达乳腺癌SKBR3细胞,检测它们对HER2表达的影响.随后, 将siRNA转录单元克隆入腺病毒载体, 成功包装病毒后感染SKBR3细胞, 再次测定其下调HER2的效应及其对细胞生长的影响.结果:2种有效下调HER2表达的质粒被筛选出来.将此2种质粒所含siRNA转录单元包装入腺病毒后仍然保持了原有的基因沉默效应.HER2下调增加了SKBR3细胞中G1期细胞的比例,并且诱导部分细胞凋亡.MTT和细胞长期增殖抑制实验表明腺病毒介导的RNA干涉抑制了SKBR3细胞生长.结论:重组腺病毒介导的RNA干涉能够下调HER2的表达并且对高表达HER2的乳腺癌细胞有生长抑制作用.
目的:探討採用腺病毒做為載體介導基于RNA榦涉的針對高HER2腫瘤的基因治療的可能性.方法:構建HER2-綠色熒光蛋白融閤蛋白錶達質粒pHER2-GFP,併與9種針對HER2不同靶序列的siRNA錶達質粒分彆共轉染CHO-K1細胞, 根據熒光蛋白錶達量從中篩選齣沉默效率最高的質粒.將篩選齣的質粒轉染HER2高錶達乳腺癌SKBR3細胞,檢測它們對HER2錶達的影響.隨後, 將siRNA轉錄單元剋隆入腺病毒載體, 成功包裝病毒後感染SKBR3細胞, 再次測定其下調HER2的效應及其對細胞生長的影響.結果:2種有效下調HER2錶達的質粒被篩選齣來.將此2種質粒所含siRNA轉錄單元包裝入腺病毒後仍然保持瞭原有的基因沉默效應.HER2下調增加瞭SKBR3細胞中G1期細胞的比例,併且誘導部分細胞凋亡.MTT和細胞長期增殖抑製實驗錶明腺病毒介導的RNA榦涉抑製瞭SKBR3細胞生長.結論:重組腺病毒介導的RNA榦涉能夠下調HER2的錶達併且對高錶達HER2的乳腺癌細胞有生長抑製作用.
목적:탐토채용선병독주위재체개도기우RNA간섭적침대고HER2종류적기인치료적가능성.방법:구건HER2-록색형광단백융합단백표체질립pHER2-GFP,병여9충침대HER2불동파서렬적siRNA표체질립분별공전염CHO-K1세포, 근거형광단백표체량종중사선출침묵효솔최고적질립.장사선출적질립전염HER2고표체유선암SKBR3세포,검측타문대HER2표체적영향.수후, 장siRNA전록단원극륭입선병독재체, 성공포장병독후감염SKBR3세포, 재차측정기하조HER2적효응급기대세포생장적영향.결과:2충유효하조HER2표체적질립피사선출래.장차2충질립소함siRNA전록단원포장입선병독후잉연보지료원유적기인침묵효응.HER2하조증가료SKBR3세포중G1기세포적비례,병차유도부분세포조망.MTT화세포장기증식억제실험표명선병독개도적RNA간섭억제료SKBR3세포생장.결론:중조선병독개도적RNA간섭능구하조HER2적표체병차대고표체HER2적유선암세포유생장억제작용.
