CAJ | 학술논문

[目的]为临床研究和治疗某些病原微生物引起的感染提供依据.[方法]参照Lfcin B的氨基酸序列,利用化学合成法合成Lfcin B基因并克隆到pPIC9K载体中,转化到酵母菌GS115感受态细胞中,用抗性选择标记G418筛选出高拷贝酵母菌转化子.利用甲醇诱导表达重组Lfcin B,经Tricine-SDS-PAGE电泳检测目的蛋白牛乳铁蛋白素的表达情况,同时通过体外抑菌试验检测表达产物的抑茵活性.[结果]提取的酵母菌DNA扩增出1条预期的560 bp左右的特异性条带.目的基因已经成功克隆到pPIC9K载体中,并转到酵母菌GS115中而且获得了表达.重组酵母表达上清中牛乳铁蛋白素抗菌肽对沙门氏肠炎杆菌的抗菌活性为42.857 IU/ml,表明LfcinB基因的酵母表达载体构建成功.[结论]该研究证明利用化学合成法直接合成编码Lfcin B的DNA构建真核表达载体、通过生物发酵工程来制备LfcinB是可行的.-PAGE电泳检测目的蛋白牛乳铁蛋白素的表达情况,同时通过体外抑菌试验检测表达产物的抑茵活性.[结果]提取的酵母菌DNA扩增出1条预期的560 bp左右的特异性条带.目的基因已经成功克隆到pPIC9K载体中并转到酵母菌GS115中而且获得了表达.重组酵母表达上清中牛乳铁蛋白素抗菌肽对沙门氏肠炎杆菌的抗菌活性为42.857 IU/ml,表明LfcinB基因的酵母表达栽体构建成功.[结论]该研究证明利用化学合成法直接合成编码Lfcin B的DNA构建真核表达载体、通过生物发酵工程来制备LfcinB是可行的.-PAGE电泳检测目的蛋白牛乳铁蛋白素的表达
[목적]위림상연구화치료모사병원미생물인기적감염제공의거.[방법]삼조Lfcin B적안기산서렬,이용화학합성법합성Lfcin B기인병극륭도pPIC9K재체중,전화도효모균GS115감수태세포중,용항성선택표기G418사선출고고패효모균전화자.이용갑순유도표체중조Lfcin B,경Tricine-SDS-PAGE전영검측목적단백우유철단백소적표체정황,동시통과체외억균시험검측표체산물적억인활성.[결과]제취적효모균DNA확증출1조예기적560 bp좌우적특이성조대.목적기인이경성공극륭도pPIC9K재체중,병전도효모균GS115중이차획득료표체.중조효모표체상청중우유철단백소항균태대사문씨장염간균적항균활성위42.857 IU/ml,표명LfcinB기인적효모표체재체구건성공.[결론]해연구증명이용화학합성법직접합성편마Lfcin B적DNA구건진핵표체재체、통과생물발효공정래제비LfcinB시가행적.-PAGE전영검측목적단백우유철단백소적표체정황,동시통과체외억균시험검측표체산물적억인활성.[결과]제취적효모균DNA확증출1조예기적560 bp좌우적특이성조대.목적기인이경성공극륭도pPIC9K재체중병전도효모균GS115중이차획득료표체.중조효모표체상청중우유철단백소항균태대사문씨장염간균적항균활성위42.857 IU/ml,표명LfcinB기인적효모표체재체구건성공.[결론]해연구증명이용화학합성법직접합성편마Lfcin B적DNA구건진핵표체재체、통과생물발효공정래제비LfcinB시가행적.-PAGE전영검측목적단백우유철단백소적표체