生命科学研究
生命科學研究
생명과학연구
LIFE SCIENCE RESEARCH
2008年
1期
20-23
,共4页
曾雄智%邓梅春%彭莹%魏文廷%王贤纯%梁宋平
曾雄智%鄧梅春%彭瑩%魏文廷%王賢純%樑宋平
증웅지%산매춘%팽형%위문정%왕현순%량송평
教钊缨毛蛛毒素-V%固相多肽合成%突变体%氧化复性%膜片钳
教釗纓毛蛛毒素-V%固相多肽閤成%突變體%氧化複性%膜片鉗
교쇠영모주독소-V%고상다태합성%돌변체%양화복성%막편겸
敬钊缨毛蛛毒素-V(jingzhauotoxin-V,JZTX-V)是从敬钊缨毛蛛粗毒中纯化到的一种新型河豚毒素不敏感型钠通道抑制剂,为了深入研究该毒素的结构与功能关系,应用芴甲氧羰基(Fmoc)固相多肽化学合成方法合成了用丙氨酸(Ala)替代JZTX-V第4位赖氨酸残基的突变体K4A-JZTX-V,合成线性多肽经反相高效液相色谱分离纯化后进行谷胱甘肽氧化复性.复性产物分别用MALDI-TOF/TOF质谱进行相时分子质量的鉴定,用膜片钳电生理方法进行电压门控钠通道抑制活性分析.研究结果表明,Lys4被Ala取代后,K4A-JZTX-V对大鼠背根神经节细胞膜上表达的河豚毒素敏感型(TTX-S)钠通道的抑制活性与天然JZTX-V基本相当,提示Lys4与JZTX-V时TTX-S钠通道的抑制活性关系不大;而K4A-JZTX-V对河豚毒素不敏感型(TTX-R)钠通道的抑制活性却比天然JZTX-V下降了约8.3倍,说明Lye4是JZTX-V与河豚毒素不敏感型钠通道抑制活性相关的氨基酸残基.
敬釗纓毛蛛毒素-V(jingzhauotoxin-V,JZTX-V)是從敬釗纓毛蛛粗毒中純化到的一種新型河豚毒素不敏感型鈉通道抑製劑,為瞭深入研究該毒素的結構與功能關繫,應用芴甲氧羰基(Fmoc)固相多肽化學閤成方法閤成瞭用丙氨痠(Ala)替代JZTX-V第4位賴氨痠殘基的突變體K4A-JZTX-V,閤成線性多肽經反相高效液相色譜分離純化後進行穀胱甘肽氧化複性.複性產物分彆用MALDI-TOF/TOF質譜進行相時分子質量的鑒定,用膜片鉗電生理方法進行電壓門控鈉通道抑製活性分析.研究結果錶明,Lys4被Ala取代後,K4A-JZTX-V對大鼠揹根神經節細胞膜上錶達的河豚毒素敏感型(TTX-S)鈉通道的抑製活性與天然JZTX-V基本相噹,提示Lys4與JZTX-V時TTX-S鈉通道的抑製活性關繫不大;而K4A-JZTX-V對河豚毒素不敏感型(TTX-R)鈉通道的抑製活性卻比天然JZTX-V下降瞭約8.3倍,說明Lye4是JZTX-V與河豚毒素不敏感型鈉通道抑製活性相關的氨基痠殘基.
경쇠영모주독소-V(jingzhauotoxin-V,JZTX-V)시종경쇠영모주조독중순화도적일충신형하돈독소불민감형납통도억제제,위료심입연구해독소적결구여공능관계,응용물갑양탄기(Fmoc)고상다태화학합성방법합성료용병안산(Ala)체대JZTX-V제4위뢰안산잔기적돌변체K4A-JZTX-V,합성선성다태경반상고효액상색보분리순화후진행곡광감태양화복성.복성산물분별용MALDI-TOF/TOF질보진행상시분자질량적감정,용막편겸전생리방법진행전압문공납통도억제활성분석.연구결과표명,Lys4피Ala취대후,K4A-JZTX-V대대서배근신경절세포막상표체적하돈독소민감형(TTX-S)납통도적억제활성여천연JZTX-V기본상당,제시Lys4여JZTX-V시TTX-S납통도적억제활성관계불대;이K4A-JZTX-V대하돈독소불민감형(TTX-R)납통도적억제활성각비천연JZTX-V하강료약8.3배,설명Lye4시JZTX-V여하돈독소불민감형납통도억제활성상관적안기산잔기.
