南京医科大学学报（自然科学版）
南京醫科大學學報（自然科學版）
남경의과대학학보（자연과학판）
ACTA UNIVERSITATIS MEDICINALIS NANJING
2008年
6期
722-725,766
,共5页
乔伟振%孟继鸿%董晨%谢平%杨燕%李小雯
喬偉振%孟繼鴻%董晨%謝平%楊燕%李小雯
교위진%맹계홍%동신%사평%양연%리소문
丙型肝炎病毒%pET系统%大肠杆菌%蛋白表达
丙型肝炎病毒%pET繫統%大腸桿菌%蛋白錶達
병형간염병독%pET계통%대장간균%단백표체
目的:探讨丙型肝炎病毒(HCV)不同基因片段重组载体在pET大肠杆菌系统中的蛋白表达情况.方法:分别将构建好的含有HCV C、NS3、NS5片段基因的pET重组质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)中.通过卡那霉素抗性筛选转化子.经过IPTG诱导表达相应的重组蛋白,通过Ni-NTA凝胶亲和层析纯化各目标蛋白,并分别计算各重组蛋白的浓度.结果:分别诱导表达含有HCVC、NS3、NS5片段基因的重组蛋白,各蛋白的浓度分别为:3.557(1型NS3)、4.238(6型NS3)、2.087(NS5)、1.490g/L(C).结论:在相同条件下,诱导表达含有HCV不同基因片段的重组载体,所得到的蛋白丰度存在差异.
目的:探討丙型肝炎病毒(HCV)不同基因片段重組載體在pET大腸桿菌繫統中的蛋白錶達情況.方法:分彆將構建好的含有HCV C、NS3、NS5片段基因的pET重組質粒轉化至大腸桿菌BL21(DE3)中.通過卡那黴素抗性篩選轉化子.經過IPTG誘導錶達相應的重組蛋白,通過Ni-NTA凝膠親和層析純化各目標蛋白,併分彆計算各重組蛋白的濃度.結果:分彆誘導錶達含有HCVC、NS3、NS5片段基因的重組蛋白,各蛋白的濃度分彆為:3.557(1型NS3)、4.238(6型NS3)、2.087(NS5)、1.490g/L(C).結論:在相同條件下,誘導錶達含有HCV不同基因片段的重組載體,所得到的蛋白豐度存在差異.
목적:탐토병형간염병독(HCV)불동기인편단중조재체재pET대장간균계통중적단백표체정황.방법:분별장구건호적함유HCV C、NS3、NS5편단기인적pET중조질립전화지대장간균BL21(DE3)중.통과잡나매소항성사선전화자.경과IPTG유도표체상응적중조단백,통과Ni-NTA응효친화층석순화각목표단백,병분별계산각중조단백적농도.결과:분별유도표체함유HCVC、NS3、NS5편단기인적중조단백,각단백적농도분별위:3.557(1형NS3)、4.238(6형NS3)、2.087(NS5)、1.490g/L(C).결론:재상동조건하,유도표체함유HCV불동기인편단적중조재체,소득도적단백봉도존재차이.
