中国人兽共患病学报
中國人獸共患病學報
중국인수공환병학보
CHINESE JOURNAL OF ZOONOSES
2009年
1期
9-12,16
,共5页
余莉%李霞%郜玉峰%罗庆礼%乔增培%沈继龙
餘莉%李霞%郜玉峰%囉慶禮%喬增培%瀋繼龍
여리%리하%고옥봉%라경례%교증배%침계룡
弓形虫%嘌呤代谢%腺苷激酶%次黄嘌呤-黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶%RNA干扰%siRNA
弓形蟲%嘌呤代謝%腺苷激酶%次黃嘌呤-黃嘌呤-鳥嘌呤燐痠覈糖轉移酶%RNA榦擾%siRNA
궁형충%표령대사%선감격매%차황표령-황표령-조표령린산핵당전이매%RNA간우%siRNA
目的 探讨siRNA同时干扰嘌呤补救合成途径中两个关键酶对弓形虫增殖速率的影响.方法 将针对腺苷激酶(AK)和次黄嘌呤-黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HXGPRT)的siRNA同时电转染弓形虫,然后将弓形虫接种人包皮成纤维细胞(HFF),24h和40h后Giemsa染色,光镜下计数假包囊内弓形虫速殖子数目,计算弓形虫平均倍增次数.同时将弓形虫进行模拟电转,接种HFF细胞后,不加磺胺嘧啶进行培养作为阴性对照,加入10μg/mL磺胺嘧啶培养作为阳性对照.结果 在接种HFF细胞后24h,4μmol/L的AK siRNA786和HXGPRT siRNA415联合电转弓形虫、阳性对照组及阴性对照组弓形虫的平均倍增次数分别为:1.64±0.95、1.04±0.88及2.32±0.90,前两组与后者相比倍增次数明显减少(P<0.05).在接种后40h,siRNA联合电转弓形虫与阳性对照组弓形虫的平均倍增次数分别为3.00±1.04,2.56±1.04,与阴性对照组相比(3.60±0.80)差异有显著性(P<0.05).结论 嘌呤补救合成途径中的两个关键酶-AK和HXGPRT被其siRNA同时抑制后,弓形虫在细胞内的增殖速率显著减缓.
目的 探討siRNA同時榦擾嘌呤補救閤成途徑中兩箇關鍵酶對弓形蟲增殖速率的影響.方法 將針對腺苷激酶(AK)和次黃嘌呤-黃嘌呤-鳥嘌呤燐痠覈糖轉移酶(HXGPRT)的siRNA同時電轉染弓形蟲,然後將弓形蟲接種人包皮成纖維細胞(HFF),24h和40h後Giemsa染色,光鏡下計數假包囊內弓形蟲速殖子數目,計算弓形蟲平均倍增次數.同時將弓形蟲進行模擬電轉,接種HFF細胞後,不加磺胺嘧啶進行培養作為陰性對照,加入10μg/mL磺胺嘧啶培養作為暘性對照.結果 在接種HFF細胞後24h,4μmol/L的AK siRNA786和HXGPRT siRNA415聯閤電轉弓形蟲、暘性對照組及陰性對照組弓形蟲的平均倍增次數分彆為:1.64±0.95、1.04±0.88及2.32±0.90,前兩組與後者相比倍增次數明顯減少(P<0.05).在接種後40h,siRNA聯閤電轉弓形蟲與暘性對照組弓形蟲的平均倍增次數分彆為3.00±1.04,2.56±1.04,與陰性對照組相比(3.60±0.80)差異有顯著性(P<0.05).結論 嘌呤補救閤成途徑中的兩箇關鍵酶-AK和HXGPRT被其siRNA同時抑製後,弓形蟲在細胞內的增殖速率顯著減緩.
목적 탐토siRNA동시간우표령보구합성도경중량개관건매대궁형충증식속솔적영향.방법 장침대선감격매(AK)화차황표령-황표령-조표령린산핵당전이매(HXGPRT)적siRNA동시전전염궁형충,연후장궁형충접충인포피성섬유세포(HFF),24h화40h후Giemsa염색,광경하계수가포낭내궁형충속식자수목,계산궁형충평균배증차수.동시장궁형충진행모의전전,접충HFF세포후,불가광알밀정진행배양작위음성대조,가입10μg/mL광알밀정배양작위양성대조.결과 재접충HFF세포후24h,4μmol/L적AK siRNA786화HXGPRT siRNA415연합전전궁형충、양성대조조급음성대조조궁형충적평균배증차수분별위:1.64±0.95、1.04±0.88급2.32±0.90,전량조여후자상비배증차수명현감소(P<0.05).재접충후40h,siRNA연합전전궁형충여양성대조조궁형충적평균배증차수분별위3.00±1.04,2.56±1.04,여음성대조조상비(3.60±0.80)차이유현저성(P<0.05).결론 표령보구합성도경중적량개관건매-AK화HXGPRT피기siRNA동시억제후,궁형충재세포내적증식속솔현저감완.
