河北师范大学学报（自然科学版）
河北師範大學學報（自然科學版）
하북사범대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF HEBEI NORMAL UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE)
2009年
6期
810-814
,共5页
苏建臣%邴雷%李世丽%高雷更%葛荣朝
囌建臣%邴雷%李世麗%高雷更%葛榮朝
소건신%병뢰%리세려%고뢰경%갈영조
抗菌肽%Protegrin%定点诱变%拼接PCR%抑菌实验
抗菌肽%Protegrin%定點誘變%拼接PCR%抑菌實驗
항균태%Protegrin%정점유변%병접PCR%억균실험
通过对抗菌肽Protegrin成熟肽的氨基酸组成和作用机理分析,并根据已报道的Protegrin基因序列设计引物,PCR扩增获得定点诱变的突变体基因pg-g,其编码蛋白的末端相对于野生型增加1个非极性氨基酸Gly.利用表达载体pET-28a将突变体基因pg-g转化到大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达后,经SDS-PAGE检测表明目的蛋白得到成功表达.通过对表达产物进行抑菌实验发现,定点突变基因pg-g表达产物对大肠杆菌的抑菌效果有明显提高.
通過對抗菌肽Protegrin成熟肽的氨基痠組成和作用機理分析,併根據已報道的Protegrin基因序列設計引物,PCR擴增穫得定點誘變的突變體基因pg-g,其編碼蛋白的末耑相對于野生型增加1箇非極性氨基痠Gly.利用錶達載體pET-28a將突變體基因pg-g轉化到大腸桿菌BL21(DE3),IPTG誘導錶達後,經SDS-PAGE檢測錶明目的蛋白得到成功錶達.通過對錶達產物進行抑菌實驗髮現,定點突變基因pg-g錶達產物對大腸桿菌的抑菌效果有明顯提高.
통과대항균태Protegrin성숙태적안기산조성화작용궤리분석,병근거이보도적Protegrin기인서렬설계인물,PCR확증획득정점유변적돌변체기인pg-g,기편마단백적말단상대우야생형증가1개비겁성안기산Gly.이용표체재체pET-28a장돌변체기인pg-g전화도대장간균BL21(DE3),IPTG유도표체후,경SDS-PAGE검측표명목적단백득도성공표체.통과대표체산물진행억균실험발현,정점돌변기인pg-g표체산물대대장간균적억균효과유명현제고.
