安徽农业科学
安徽農業科學
안휘농업과학
JOURNAL OF ANHUI AGRICULTURAL SCIENCES
2011年
6期
3604-3605,3614
,共3页
王海丽%徐公义%葛长城%赵德明
王海麗%徐公義%葛長城%趙德明
왕해려%서공의%갈장성%조덕명
猪链球菌2型%溶血素%克隆%表达%抗原性
豬鏈毬菌2型%溶血素%剋隆%錶達%抗原性
저련구균2형%용혈소%극륭%표체%항원성
[目的]研究四川资阳脑膜炎病例猪链球菌2型分离株ZYH33溶血素(suliysin,sly)基因的克隆表达及融合蛋白生物活性分析.[方法]从sly中获取第230～593氨基酸残基区域的基因片段,克隆至pMD18-T载体并鉴定,以重组pMD18-T/sly为模板PCR扩增基因片段,与表达载体pQE-30连接,转化至大肠杆菌TGl,重组子经PCR、酶切、测序鉴定.IPTG诱导重组蛋白表达,Western blot法鉴定融合蛋白的抗原性.[结果]基因片段在大肠杆菌中得到了表达,表达的融合蛋白可被猪链球菌2型菌体ZY05719抗血清识别,具有抗原性.[结论]所克隆、表达的溶血素区域可作为猪链球菌的诊断抗原,为基因工程疫苗的研制奠定了基础.
[目的]研究四川資暘腦膜炎病例豬鏈毬菌2型分離株ZYH33溶血素(suliysin,sly)基因的剋隆錶達及融閤蛋白生物活性分析.[方法]從sly中穫取第230～593氨基痠殘基區域的基因片段,剋隆至pMD18-T載體併鑒定,以重組pMD18-T/sly為模闆PCR擴增基因片段,與錶達載體pQE-30連接,轉化至大腸桿菌TGl,重組子經PCR、酶切、測序鑒定.IPTG誘導重組蛋白錶達,Western blot法鑒定融閤蛋白的抗原性.[結果]基因片段在大腸桿菌中得到瞭錶達,錶達的融閤蛋白可被豬鏈毬菌2型菌體ZY05719抗血清識彆,具有抗原性.[結論]所剋隆、錶達的溶血素區域可作為豬鏈毬菌的診斷抗原,為基因工程疫苗的研製奠定瞭基礎.
[목적]연구사천자양뇌막염병례저련구균2형분리주ZYH33용혈소(suliysin,sly)기인적극륭표체급융합단백생물활성분석.[방법]종sly중획취제230～593안기산잔기구역적기인편단,극륭지pMD18-T재체병감정,이중조pMD18-T/sly위모판PCR확증기인편단,여표체재체pQE-30련접,전화지대장간균TGl,중조자경PCR、매절、측서감정.IPTG유도중조단백표체,Western blot법감정융합단백적항원성.[결과]기인편단재대장간균중득도료표체,표체적융합단백가피저련구균2형균체ZY05719항혈청식별,구유항원성.[결론]소극륭、표체적용혈소구역가작위저련구균적진단항원,위기인공정역묘적연제전정료기출.
